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北京诺博莱德科技有限公司

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资料下载

甲基绿-派洛宁染色液 操作指导

最近更新时间:2016-6-1

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详细介绍:

甲基绿-派洛宁染色液

产品简介:

甲基绿-派洛宁染色液(Methyl Green-Pyronin Stain,MGP)甲基绿-派洛宁染色液是一种把细胞核染成绿色或蓝绿色,把细胞浆和细胞核中的核仁染成红色或红紫色的染色液。甲基绿又称双绿SF,属于碱性染料,是具有金属光泽的绿色微结晶或粉末,分子量为608.78,分子式为C27H35Cl4N3Zn。甲基绿和细胞核中的DNA结合,从而使细胞核染成绿色或蓝绿色,派洛宁可以和细胞浆或核仁中的RNA结合,从而使细胞浆和核仁染成红色或红紫色。

NobleRyder甲基绿-派洛宁染色液经过改良,不含甲醇,在组织或细胞染色中对细胞核进行染色,其中的甲基绿经过提纯,更容易着色。本染色液也可以和免疫荧光染色或免疫组化染色配合使用。10ml染色液可以染色20个样本。

产品组成

编号

名称

D6601

D6601

Storage

Methyl Green-Pyronin Stain

50ml

100ml

RT避光

使用说明书

1

 

自备材料:

1、系列乙醇、蒸馏水

2、滤纸、RNase(可选)

3、丁三醇或丙酮或正戊醇

4、4%多聚甲醛

 

操作步骤(仅供参考)

()石蜡切片染色

1、组织入Carnoy固定液或10%中性福尔马林,固定35h。

2、切片5μm,常规脱蜡至水,蒸馏水稍洗。

3、入Methyl Green-Pyronin Stain,室温浸染3060min。

4、取出切片,用滤纸稍微吸干切片周围染色液。

5、用丁三醇(也可用丙酮或正戊醇)冲洗3次,每次23min

6、二甲苯透明,中性树胶封固。

()冰冻切片染色

1、蒸馏水冲洗2min。

2、切片入Methyl Green-Pyronin Stain,室温浸染2550min。

3、用蒸馏水冲洗2次,此时样本呈蓝色。

4、余下步骤同石蜡切片染色。

()细胞染色

1、用4%多聚甲醛固定10min以上。

2、蒸馏水洗涤2min。

3、换用新鲜的蒸馏水,再洗涤2min

4、用Methyl Green-Pyronin Stain染色510min

5、显微镜下观察。

()荧光染色

1、如果进行免疫荧光染色,在染色后应用70%乙醇洗涤2次,每次2min。

2、95%乙醇脱水2min

3、PBS或盐水或TBS等用于免疫染色或荧光染料染色的溶液浸泡5min

4、进行免疫荧光染色或其它荧光染料的染色。

染色结果:

 

细胞核(DNA)

绿色或蓝绿色

细胞浆和核仁(RNA

红色或红紫色

 

阴性对照:

1、取另外一张连续切片入RNase(1mg/ml),37℃恒温箱内孵育3h,蒸馏水冲洗干净。

2、入Methyl Green-Pyronin Stain染色,余下步骤同上。RNA染色结果为阴性。

 

注意事项:

1、使用染色液时建议先取1~2个样品做预实验。

2Methyl Green-Pyronin Stain染色可以根据染色结果和要求调整时间。

3、有些粘液细胞有可能被派洛宁染成红色,应注意区分。

 

有效期:12个月有效。

 

相关产品:

 

产品编号

产品名称

P4813

RIPA裂解液(强)

 

总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP单试剂比色法)

 

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