亚洲精品综合日韩中文字幕网站_精品综合久久久久97_中文在线天堂网www_久久精品免费一区二区三区_91久久国产综合精品女同国语_久久资源总站在线国产成人

上?;鄯f生物科技有限公司

慧穎Elisa試劑盒一般操作流程

時間:2015-3-12閱讀:1390

已稀釋好的ABCTMB顯色液在加入酶標板孔前都應(yīng)預(yù)先在37℃中平衡至少30分鐘。試劑或樣品稀釋時,切不可忘記混勻。每次檢測都應(yīng)該做標準曲線。用戶須估計樣品待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。

1.    確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標板孔數(shù)目,并增加1孔作為TMB空白顯色孔。總數(shù)=樣品數(shù)+9;做雙份檢測時×2。其余重包裝好放如冰箱中。

2.    1000pg/ml 500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml62.5pg/ml,31.3pg/ml,15.6pg/ml的標準品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為零孔。對于人血清、血漿、體液、組織勻漿或細胞培養(yǎng)上清,直接加已用樣品稀釋液稀釋的樣品100μι。

3. 酶標板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。

4. 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標板內(nèi)的液體;或甩去酶標板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。不洗。

5. 將準備好的生物素抗人IL-2抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng)60分鐘。

6. 0.01M TBS0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。

7. 將準備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入(TMB空白顯色孔除外)。37℃反應(yīng)30分鐘。

8. 0.01M TBS0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。

9. 按每孔90μι依次加入已在37℃平衡30分鐘的TMB顯色液,37℃避光反應(yīng)8-12分鐘(注意:顯色時間供參考,因用戶實驗室條件差異,*顯色時間會有所不同。此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯)。

10. 按每孔0.1ml依次加入TMB終止液,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。

11. 用酶標儀在450nm測定O.D.值。顯色的程度通過ELISA酶標檢測儀測定光密度(ODoptical density)記錄。通過細胞因子的標準蛋白做已知濃度系列稀釋,測出OD值后繪制出標準曲線,根據(jù)標準曲線可推算出標本中細胞因子的含量,一般使用計算機軟件可以很快得到結(jié)果

有兩種設(shè)定空白對照的方案:

1)將TMB空白顯色孔設(shè)為對照。所有的標準品和樣品的吸光值減去零孔的吸光值后,在坐標紙上畫出曲線,以吸光值作為縱坐標,以濃度作為橫坐標。

2)將零孔設(shè)為對照。得到的數(shù)據(jù)可以直接在坐標紙上畫出曲線。

12. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標上找出對應(yīng)的濃度。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N

會員登錄

X

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~

以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實性、準確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負責(zé),化工儀器網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。

溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險,建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

撥打電話
在線留言
合肥市| 青海省| 思南县| 曲阜市| 冕宁县| 哈尔滨市| 泽州县| 滁州市| 永安市| 松溪县| 英吉沙县| 宁武县| 竹山县| 河北区| 和平区| 平阴县| 汉川市| 通城县| 敦煌市| 增城市| 驻马店市| 平武县| 屯昌县| 多伦县| 土默特右旗| 宁海县| 新巴尔虎右旗| 南丰县| 苏尼特左旗| 通榆县| 嘉峪关市| 马公市| 克东县| 横山县| 湖口县| 丰城市| 焦作市| 宜昌市| 广丰县| 淳化县| 册亨县|