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蜈蚣中黄曲霉毒素等11种真菌毒素液质质检测方法

阅读:266      发布时间:2024-8-9
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一、药典和测定法要求:

根据《中国药典》2020年版规定:中药材蜈蚣及饮片需检测水分、总灰分和黄曲霉毒素,其中黄曲霉毒素按照真菌毒素测定法(通则2351)测定,“本品每1000g含黄曲霉毒素B1不得超过5μg,黄曲霉毒素B1,黄曲霉毒素B2,黄曲霉毒素G1,黄曲霉毒素G2的总量不超过10μg"。

真菌毒素测定法(通则2351):多种真菌毒素检测的液质质法说明如下:

蜈蚣中黄曲霉毒素等11种真菌毒素液质质检测方法

此方法充分利用液质质仪器的高灵敏度和高精确度的优势,一次进样分析多种真菌毒素,大大提高了效能,节约人力和时间成本,因此越来越多地实验室开发了多种真菌毒素检测的液质质方法。

真菌毒素测定法(通则2351)中,上述筛查测定方法的前处理净化采用传统HLB柱,经过活化、平衡、淋洗、洗脱地过程后,采用外标法进行定量分析。此方法比采用若干种免疫亲和柱的前处理净化方法简便许多,但仍然被困于传统SPE的操作步骤,前处理步骤仍显繁琐。

二、FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素检测专用柱

因此我们开发出FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素检测专用柱,原理上通过填料保留杂质,所得滤液极为目标物,不需要活化平衡淋洗洗脱,操作步骤极其简单,节省试剂、设备和耗材,因此在大大提高效率地同时,节省大量的人力和费用成本。

同时,此蜈蚣真菌毒素专用柱复合多种有效成分材料填充在净化柱中,开发专用的操作方法平衡11种真菌毒素的回收率和RSD,经过若干次地不懈努力,终于取得合适配方和操作步骤。通过一次FaTEx-CM蜈蚣专用柱的净化处理,上机到LC-MSMS分析,得到的结果符合定量分析的法规要求。

三、前处理方法之蜈蚣中真菌毒素检测专用柱

2 蜈蚣均质后,称取样品2g左右

2 加一定体积V1的去离子水,静置10分钟

2 加一定体积V2的酸化乙腈水溶液震荡萃取30min

2 15,3500 rpm离心5min

2 取一定体积的上清液V3倒入FaTEx-CM_2vac专用柱,每秒1滴流出

2 收集全部滤液,取一定体积V4的滤液,加一定体积V5的去离稀释

2 0.22µm filter过滤后上机LC-MS/MS分析

四、仪器分析方法

蜈蚣中黄曲霉毒素等11种真菌毒素液质质检测方法蜈蚣中黄曲霉毒素等11种真菌毒素液质质检测方法

五、11种真菌毒素的清单,欢迎联络询问回收率和RSD

英文名称

中文名称

样品浓度 (ng/g)

Aflatoxin B1

黄曲霉毒素B1

5

Aflatoxin B2

黄曲霉毒素B2

5

Aflatoxin G1

黄曲霉毒素G1

5

Aflatoxin G2

黄曲霉毒素G2

5

Deoxynivalenol

呕吐毒素

50

Fumonisin B1

伏马毒素B1

200

Fumonisin B2

伏马毒素B2

200

Ochartoxin A

赭曲霉毒素A

5

T-2 toxin

T-2毒素

10

Zearalenone

玉米赤霉烯酮

50

HT-2 toxin

HT-2毒素

50



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