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详细介绍
商品属性：
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 50管/48样 |
产品货号 | AS6321141 |
商品介绍：
测定意义CA又称枸橼酸，广泛存在于各种生物胞质中，是生物体内重要的有机酸。CA也存在于线粒体基质中，是三羧酸循环第一步反应的产物，与脂肪、蛋白质和糖最终转化为二氧化碳密切相关。测定原理酸性条件下，柠檬酸可将Cr6+还原成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。实验中所需仪器及设备可见分光光度计、低温离心机、掌上离心机、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 |
试剂的组成和配制：
酸性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体10 mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体3 mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，-20 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4 ℃保存，用时加入3mL蒸馏水，混匀，用不完的试剂4℃保存一周；试剂五：液体3.6mL×1瓶，4 ℃保存；试剂六：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；试剂七：液体50mL×1瓶，4 ℃保存。
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清（浆）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建 议取约0.1ml血清（浆），加入1ml碱性提取液），95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）； 冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑兆橹柿浚╣）：酸性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。喊凑兆橹柿浚╣）：碱性提取液体积（ml）为1：5~10的比例（建议取约0.1g 组织，加入1ml碱性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（盖紧，以防止水分散失）；冰浴 中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：酸性 提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl碱性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 NADH的提?。合仁占赴蛳妇嚼胄墓苣?，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：碱 性提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液）， 超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次），95℃水浴5min （盖紧，以防止水分散失）；冰浴中冷却后，10000g 4 ℃离心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混匀，10000g 4 ℃离心10min，取上清，置冰上待测。 |
ADH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到340 nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 测定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4?！鰽测定管=A3-A4。
注意：空白管只需测定一次。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
23-羟基龙吉苷元英文名： Oxaloacetic acid磷化丝裂原活化蛋白激1/2抗体包装5g
23-乙酰去氢泽泻B英文名： Zinc sulfate, heptahydrate电子转移黄蛋白α抗体包装25g
23-乙酰泽泻B；泽泻B醋酯(标准品)英文名： Potassium sodium tatrate, tetrahydrate前列腺E受体蛋白4抗体包装5g
24-乙酰泽泻F英文名： Biuret风疹病糖蛋白抗体包装1g
25(S)-鲁斯可皂苷元-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基...英文名： Magnesium sulfate anhydrousEFR3A蛋白抗体包装5g
25-脱泽泻A;泽泻G(标准品)英文名： Quartz sandENAH蛋白抗体包装1g
26-脱氧升麻苷英文名： 3-AT乙基二脑病蛋白抗体包装5g
28-O-顺芷?；赘傩萝赵⑽拿?Sodium phosphate, tribasic, dodecahydrate转录因子E2F-3抗体包装10MG
28-去基-β-香树脂英文名： Sodium phosphate, dibasic, anhydrous转录因子E2F-5抗体包装100ml
28-去基-β-香树脂（标准品）英文名： FerrozineDNA切除修复蛋白1抗体包装25ml
2’-乙?；锘ㄌ擒?标准品)英文名： Sodium acetate, trihydrate转录因子E2F6抗体包装1g
2"-O-没食子酰基金丝桃苷（标准品）英文名： Thidiazuron胶质谷运载蛋白2抗体包装25g
3"-O-基表没食子儿茶没食子酯英文名： Iodine胶质谷运载蛋白3抗体(神经/上皮谷运载蛋白)包装5g
3',4',5',5,7-五氧基黄（标准品）英文名： ADA, Alcohol dehydrogenase 内皮转化2抗体包装1g
3',4',7-三羟基黄(标准品)英文名： Tween-80嗜性粒阳离子蛋白抗体包装5g
ATCC16371资源名称: 红色红曲霉 质量规格：>99,USP,BR,可用于培养胎盘蛋白13试剂盒三七皂苷R1;Notoginsenosi
碱菌Alcaligenes│aquatilis 质量规格：HPLC>98%,标准品胎盘催乳试剂盒松萝;(+)-Usniacin
魏登施泰芽孢杆菌Bacillus│weihenstephanensis 质量规格：含量大于98.5%胎儿血剂盒肉苁蓉苷A;Cistanoside A
柠檬酸（CA）含量测试盒50管/48样大丽轮枝霉 1,3-二甲基-1H-噻吩并[2,3-c]吡唑-5-羧酸Ⅰ型胶原氨基末端肽Elisa
鲁氏接合酵母 2-溴-5-Ⅰ型胶原原羧基端交联肽Elisa
枯草芽孢杆 3-氟-4-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)苯双解丝蛋白1Elisa
白鲍鱼菇 二甲醋酸酯原颗粒膜糖蛋白Elisa
米曲霉 4--2,6-二氟苯甲黑转铁蛋白Elisa
稀奇链霉 4-三氟甲基-2-羟基喹啉强啡肽A1-13Elisa
白色假丝酵母* 2,3,5-三-4-吡啶甲分泌型卷曲相关蛋白4Elisa
小青霉 5-嘧啶甲IgG1 Fc片段Elisa
薄层 3,5-二甲苯新蝶呤Elisa
细疣篮状 4-溴-3-白三烯A4Elisa
亮白曲霉 1-Cbz-吡咯烷巨噬激1Elisa
金龟子绿僵 2,4,6-三苯异酸酯血管内皮生长因子受体3Elisa
蜡状芽孢杆 1-(2-溴乙基)-3-氟苯胃饥饿Elisa
折叠马赛 1-甲基吡唑-3-甲酸尿香草杏仁酸Elisa
棘孢木霉 5-甲基吡唑-3-甲酸甲酯油酰乙 Elisa
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