PAGE连续蛋白上样缓冲液公司正在销售的产品：Anti-TNF alpha Antibody大鼠游离睾酮
Anti-TMPRSS15 Antibody人乙型肝炎病前S2抗原
Anti-TMPO Antibody人庚型肝炎病IgM
Anti-TNFAIP2 Antibody大鼠雄烯二酮
Anti-TNF Alpha Antibody大鼠雌三
Anti-TNFAIP3 Antibody人输血传播病/辛

公司产品仅用于科研具有质量可靠、效果稳定、灵敏度高、操作简单、易保存等特点，咨询并订购！

产品分类：蛋白电泳

储存条件：4℃,12个月

用途：非变性连续PAGE加样缓冲液

注意事项：主要由Tris-HCl、甘氨suan、溴酚蓝等组成。

 

 

配制与标定的实验原理：

1、用EDTA二钠盐配制EDTA标准溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一种白色晶体粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室温溶解度为0.02g/100g H2O。

2、标定EDTA标准溶液的工作基准试剂，基准试剂的预处理：称量前一般应先用稀盐酸洗去氧化层，然后用水洗净，烘干。

配制步骤：

1、取适量锌片放在100mL烧杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自来水、纯水洗净，烘干、冷却。

2、用直接称量法在干燥小烧杯中准确称取0.15～0.2g Zn，盖好小表面皿。

3、用滴管从烧杯口加入5mL 1:1 盐酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地将溶液转移至250mL容量瓶中，用纯水稀释至标线，摇匀。

 

 

实验方法与判定：

1.对照品溶液的稳定性

2.对照品溶液的配制：精密量取脑对照品适量，加无水乙醇制成每1ml含脑1mg的溶液，作为对照品溶液。

3.色谱条件：以交联键合聚乙二醇为固定相的毛细管柱；柱温120℃；进样口温度250℃；检测器温度250℃；分流进样，分流比10:1。理论塔板数按脑计算应不低于10000。

4.实验方法：配制的对照品溶液，一份置冷处保存，一份置室温中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份对照品溶液，三种储备液同时稀释制成每1ml中约含50ug的溶液。照气相色谱法，并依据新对照品的峰面积计算原对照品溶液的含量。记录下来，保证原对照品溶液含量在考察期相对平均偏差不超过2.0%，验证对照品溶液在使用期内稳定可靠。

尖孢隔指孢磷化蛋白激C(T500)抗体Anti-CAPN1 AntibodyS100蛋白(S-100)

根际链霉菌磷化肿瘤抑制基因P53抗体Anti-CARD4/NOD1 AntibodyS-100B蛋白(S-100B)

葡萄球菌磷化p21激活激1抗体Anti-Carbonic Anhydrase 13/CA13 AntibodyS100B蛋白(S-100B)

黑曲霉磷化p21激活激2抗体Anti-CARD9 AntibodyRNA结合蛋白FUS(FUS/TLS)

灵芝(红芝, 赤芝)磷化p21激活激3抗体Anti-Cardiotrophin1(CT-1) AntibodyRho家族GTP1(RND1)

酿酒酵母磷化p21激活激1/2/3抗体Anti-CARM1 AntibodyRho关联含卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)

毛柄金钱菌(金针菇)磷化核糖体S6蛋白激抗体Anti-CASP1(P10) AntibodyRho GDP解离抑制因子1(ARHGDIA/GDIA1)

聚贪噬菌内分泌腺衍生血管内皮生长因子抗体Anti-CASP1(P20) AntibodyREST协阻抑因子3(RCOR3)

蜡状芽孢杆菌蛋白激样内质网激抗体Anti-CARS Antibodyras同源物基因家族成员b(RHOB)

肠膜明串珠菌前列腺特异膜抗原抗体Anti-CASP1(P20) AntibodyP选择糖蛋白配体1(PSGL-1)

假单胞菌磷脂酰肌激抗体Anti-CASP10 AntibodyP选择(P-Selectin/CD62P/GMP140)

灰平链霉菌胎盘生长因子抗体Anti-CASP12 AntibodyP选择(P-Selectin/CD62P)

污黑腐皮壳蛋白激A抗体Anti-CASP14(P10) AntibodyP选择(P-Selectin)

死亡谷芽孢杆菌蛋白激C beta 1/2抗体Anti-CASP2 AntibodyP物质受体(SP-R)

豆芽菌胎盘生长因子抗体Anti-CASP2(P12) AntibodyP物质(SP)

禾谷胎盘生长因子抗体Anti-CASP2(small) AntibodyP糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)

病毒Influenzavirus A│Avian influenza virus 质量规格：纯度98%,BR

酿酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 质量规格：>99%,选择性p110δ抑制剂

杏鲍菇Pleurotus│eryngii 质量规格：98%,BR
PAGE连续蛋白上样缓冲液5-HTT/SERT/FITC  荧光su标记5-羟色an转运蛋白IgG规格： 0.2ml

8-OHdG/FITC  荧光su标记兔抗8-羟基脱氧鸟蛋白IgG规格： 0.2ml

AACT-Alpha1 /RBITC  红色荧光su罗丹明标记α-1抗胰糜蛋白meiIgG规格： 0.2ml

AACT-Alpha1/FITC  荧光su标记α-1抗胰糜蛋白mei规格： 0.2ml

AAK1/FITC  荧光su标记AP2关联激mei1IgG规格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用筛选浓度

注意：用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。

一般而言，哺乳动物细胞50-500μg/mL；细菌/植物细胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立

注意：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线）来实现，至少选择5个浓度。

1）  第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜；注：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。

2）  根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

3）  第二天：替换旧的培养基，换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。

4）  接下来每3-4天更换新的含药物培养基。

5）  按照固定的周期（如每2天）进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数（通常是7-10天）内能够杀死绝大多数细胞的浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3.   稳定转染细胞的筛选

1）  转染48h后，用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。

注意：细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤。则当细胞过于稠密，其效率会降低。为了得到较好的筛选效果，最好将细胞稀释至丰度不超过25%

2）  每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。

3）  筛选7天后观察并评估细胞克?。洌┑男纬汕榭觥＜涞男纬煽赡芑剐枰恢芑蛘吒嗟氖奔?，这取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果。

4）   挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。

5）   之后更换正常培养基培养即可。