详细介绍
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
产品名称 | 11号染色体开放阅读框57抗体 |
英文名称 | C11orf57 |
规格 | 0.2ml |
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公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善??固宓闹票腹蹋?/span>
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
二十四(标准品) 进口/国产 规格:分析标准品,≥99.5%(GC)纯度:99%
三(标准品) 进口/国产 规格:分析标准品,≥99.8%(GC)纯度:≥98%
二十三(标准品) 进口/国产 规格:分析标准品,≥99.5% (GC)纯度:≥98%
十一(标准品) 进口/国产 规格:分析标准品,≥99.8%(GC)纯度:≥98%
十一(标准品) 进口/国产 规格:分析标准品,>99.5%(GC)纯度:98%
己二(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)纯度:≥98%
乙酰(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)纯度:≥98%
茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥99%(GC)纯度:≥98%
癸二二辛(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)纯度:≥98%
1,4丁二(BDO)(standard for GC,≥99%(GC)) 进口/国产 规格:standard for GC,≥99%(GC)纯度:≥98%
1,2,4丁三(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:standard for GC,≥99.5%(GC)纯度:≥99%
癸(Standard for GC ,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC ,≥99.5%(GC)纯度:≥98%
月桂(Standard for GC,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)纯度:≥98.0%
棕榈(Standard for GC,≥98.0%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥98.0%(GC)纯度:≥98%
水杨(standard for GC,≥99.5%(GC)) 进口/国产 规格:standard for GC,≥99.5%(GC)纯度:≥97%
油(Standard for GC,≥99%(GC)) 进口/国产 规格:Standard for GC,≥99%(GC)纯度:≥97%
SSX5 滑膜肉瘤X断点蛋白5一抗 * 0.2ml Rubitecan
STEAP4/TNFAIP9 肿瘤坏死因子α诱导蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4一抗 * 0.2ml Polyethylenepolypropylene glycol
STK31 丝氨/苏氨蛋白激酶31一抗 * 0.2ml Catharanthine hemitartrate
UTP14A/SDCCAG16 结肠癌抗原16一抗 * 0.2ml Catharanthine sulfate
XAGE2 肿瘤/抗原12家族2一抗 * 0.2ml Catharanthine sulfate
ITIH1 衍生透明质相关蛋白一抗 * 0.2ml Combretastatin A4
GBP5/Guanylate binding protein 5 鸟嘌呤核苷结合蛋白5一抗 * 0.2ml Oxytetracycline
IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88 干扰素α17一抗 * 0.2ml Oxytetracycline
11号染色体开放阅读框57抗体紫红曲Penicillin G 青霉素G抗体100 ul
灵芝(赤芝,红灵芝)8-OHdG 8-羟基脱氧鸟苷抗体100 ug
乳明串珠菌RYBP/APAP1/CD337 凋亡相关蛋白1抗体100 ug
乳酸类芽孢杆菌Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心脏特异性同源盒转录因子NKX2.5抗体100 ug
赭色掷孢酵母ADORA1 腺苷A1A受体抗体100 ug
刺囊毛霉AMP deaminase 1 腺苷单磷酸脱氨酶1抗体100 ul
休哈塔假丝酵母休哈塔亚种A2AR/Adenosine A2a receptor 腺苷A2A受体抗体100 ug
棘孢木霉AACT-Alpha1/A1ACT α-1抗胰糜蛋白酶抗体1Kit
长枝木霉AAK1 AP2关联激酶1抗体100 ug
赤散囊菌Cyp2-j3 细胞色素P450Ⅱj3抗体100 ug
赭曲霉OST-beta 有机溶质转运蛋白OSTβ抗体1 Kit
棒束青霉AANAT 芳香胺N-乙?;泼缚固?00 ul
鲜绿青霉AT2R2 血管紧张素Ⅱ受体2抗体100 ug
膨端青霉Influenza A virus (Duck) 鸭流感病毒抗体100 ug
粟酒裂殖酵母TNF-alpha 肿瘤坏死因子-α抗体100 ug
降酮短杆菌AARS2 丙氨酰tRNA合成酶2抗体100 ul
格氏李斯特氏菌TDRD9/HIG1 缺氧诱导蛋白HIG1抗体100 ug
布雷正青霉SIRT1/sirtuin 1 沉默调节蛋白1抗体100 ul