详细介绍
商品属性:
产品名称 | |
检测方法 | 可见分光光度法 |
产品规格 | 25管/24样 |
产品货号 | AS6321184 |
商品介绍:
测定意义: AAT是一个多功能蛋白大家族,主要负责催化生物体内各种?;腿ヵ;从?,在基因表达、代谢和信号传导中具有重要作用。 测定原理: AAT催化乙酰CoA转移乙酰基到丁醇,释放的CoA还原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,测定412 nm吸光度增加速率可计算AAT活性。 自备仪器和用品: 研钵、冰、台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。 |
试剂的组成和配制:
酸性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;碱性提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体10 mL×1瓶,4℃保存;试剂二:液体3 mL×1瓶,4℃保存;试剂三:粉剂×1瓶,-20 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂四:粉剂×1瓶,4 ℃保存,用时加入3mL蒸馏水,混匀,用不完的试剂4℃保存一周;试剂五:液体3.6mL×1瓶,4 ℃保存;试剂六:液体30mL×1瓶,4 ℃保存;试剂七:液体50mL×1瓶,4 ℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
NAD+和NADH的提取:
1、血清(浆)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提?。喊凑昭澹ń┨寤╩l):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建 议取约0.1ml血清(浆),加入1ml碱性提取液),95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失); 冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 2、组织中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑兆橹柿浚╣):酸性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提?。喊凑兆橹柿浚╣):碱性提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议取约0.1g 组织,加入1ml碱性提取液),冰浴研磨,95℃水浴5min(盖紧,以防止水分散失);冰浴 中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和, 混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 | 3、细胞或细菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占赴蛳妇嚼胄墓苣冢锨?,按照细菌或细胞数量(104个):酸性 提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml酸性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl碱性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 NADH的提?。合仁占赴蛳妇嚼胄墓苣?,弃上清,按照细菌或细胞数量(104个):碱 性提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml碱性提取液), 超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次),95℃水浴5min (盖紧,以防止水分散失);冰浴中冷却后,10000g 4 ℃离心10min;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,混匀,10000g 4 ℃离心10min,取上清,置冰上待测。 |
ADH测定操作:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到340 nm,蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴中保温30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸馏水、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A1和A2。△A空白管=A1-A2。。
4. 测定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL试剂二和100μL试剂四,迅速混匀后于340nm测定吸光值变化,分别记录15s和75s时吸光值,分别记为A3和A4?!鰽测定管=A3-A4。
注意:空白管只需测定一次。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
三肉豆蔻甘油酯英文名: 7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid生长分化因子3抗体包装250g
三叶甙;三叶苷(标准品)英文名: Pyranin磷化糖原合激3β抗体包装25g
桑白皮(标准品)英文名: SulfonfluoresceinG蛋白偶联受体1抗体包装5g
桑根L英文名: N-Succinimidyl 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β1抗体/鸟核苷结合蛋白β亚基1包装100mg
桑根皮英文名: N-Succinimidyl 7-Methoxycoumarin-3-carboxylateG蛋白β3抗体/鸟核苷结合蛋白β亚基3包装25ml
桑根H英文名: Sodium 5-(2-Aminoethylamino)-1-naphthalenesulfonate Hydrate鸟苷还原2抗体包装1g
?;朴⑽拿?/span> Tetrabromofluorescein Potassium SaltG蛋白偶联受体γ12抗体包装5g
桑寄生(标准品)英文名: 2',4',5',7'-Tetrabromo-3,4,5,6-tetrachlorofluorescein生长因子受体结合蛋白2相关接头蛋白2抗体包装100g
桑皮苷C(标准品)英文名: 3,4,5,6-TetrachlorofluoresceinG蛋白α亚单位蛋白Q抗体包装25g
桑皮苷F英文名: Erythrosine B生长抑制DNA损伤基因GADD45β抗体包装5mg
桑皮A英文名: Crystal Violet Nonahydrate生长抑制蛋白22抗体(基化控制J蛋白)包装25g
桑皮E英文名: 2-Aminoperimidine HydrobromideG蛋白偶联受体39抗体包装5g
桑皮H英文名: CPC Monohydrate (=Cetylpyridinium Chloride Monohydrate)桥尾蛋白抗体包装1g
桑色(标准品)英文名: Thymolphthalein Complexon半乳糖凝集8抗体包装1g
桑椹(标准品)英文名: Calcein Blue糖磷脂酰肌锚定蛋白137抗体包装5g
布雷丝枝霉Chaetocladium│brefeldii 质量规格:HPLC>98%,标准品黏多糖/糖聚糖L-酪;L-Tyrosine
产黄青霉Penicillium│chrysogenum 质量规格:≥99.0%,BR,可用于培养脑钠/脑钠尿肽试剂盒赖;L-Lysine
双环林地蘑菇Agaricus│placomyces Peck 质量规格:HPLC≥98%,标准品脑啡肽试剂盒柳穿鱼黄;Pectolinarigen
酰基转移酶(AAT)测试盒25管/24样pDC316 2-(乙基)苯IaElisa
云芝 1,4-二苄氧基苯拓扑异构10Elisa
灰树花孔 3-(二乙基)-1,2-二金黄色葡萄球肠DElisa
土壤薄层 毕鲁间隙连接蛋白43Elisa
总状毛霉 4-甲基-N-苯基苯乙二ⅠElisa
Cerrena unicolor 4-二甲氨基甲状腺反应基因Elisa
薄层属 2--3,6-二氟苄溴Tolloid样蛋白1Elisa
白僵 4-乙基肿瘤调节蛋白1Elisa
旋丝毛壳 2,6-二-7-脱氮肿瘤调节蛋白Elisa
黄白生丛赤壳 4-溴甲酯硬纤毛蛋白Elisa
苏云金芽孢杆 2-基固类生成因子1Elisa
尼泊尔正青霉 双三氟磺酰亚锂肽基精脱亚氨Elisa
嘴突凸脐蠕孢 L-(-)-苹果酸二甲酯ⅪaElisa
枯草芽孢杆 衣康酸二甲酯IXaElisa
塔宾曲霉 3,4-二氨基噻吩XIIIaElisa