詳細(xì)介紹
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。
產(chǎn)品名稱 | ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體 |
英文名稱 | ARFIP1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過(guò)程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無(wú)載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5);胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過(guò)濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
(肼基羰基)二茂鐵(>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>95.0%(HPLC)(T),用于高效液相色譜標(biāo)記純度:≥98%
二亞砜(>99.0%(GC)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
1,2,3,4四(>98.0%(GC) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
對(duì)茴香醛乙溶液(含乙和) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:用于薄層色譜顯色劑純度:≥98%
二亞砜d6 99.9原子%D(>99.0%(GC)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>99.0%(GC)純度:≥98%
重水 99.8原子%D 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:99.8原子%D純度:≥98%
3(三基硅基)1丙鈉(>98.0%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(T)純度:≥98%
二基硒(>98.0%(GC)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98.0%(GC)純度:≥98%
四基錫(>96.0%(GC)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%
二二茂鋯(>97.0%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥97%
ChirabiteAR[用于核磁共振] 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:用于核磁共振純度:≥98%
三(2,2,6,6四基3,5庚二)鐠(III)(>98%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>98%(T)純度:≥98%
三(2,2,6,6四基3,5庚二)銪(III)(>95%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>95%(T)純度:≥98%
三(6,6,7,7,8,8,8七氟2,2二基3,5辛二基)鐠(Ⅲ)(>97.0%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(S)(+)1,1'聯(lián)基2,2'雙(>97.0%(T)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>97.0%(T)純度:≥98%
(R,R)()2,3丁二(>96.0%(GC)) 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:>96.0%(GC)純度:≥98%
SPHK2 鞘氨激酶2一抗 * 0.2ml Columbianetin
STK3 絲氨/蘇氨蛋白激酶3一抗 * 0.2ml Eupatilin
IKIP IKK激酶相互作用蛋白一抗 * 0.2ml Rimonabant carboxylic acid
AMACR/P504S α基?;o酶A消旋酶一抗 * 0.1ml Zeaxanthin
CASC3/MLN51 腫瘤易感候選基因3一抗 * 0.1ml Triethylenethiophosphoramide
phosphoIKKi/IKKe(Thr500) 化核因子NFκB抑制蛋白激酶i一抗 * 0.1ml Pramipexole Base
TIAF1 TGFB1誘導(dǎo)抗凋亡因子1一抗 * 0.2ml Pramipexole Base
Cipar1 前列腺雄激素抑制信號(hào)蛋白1一抗 * 0.2ml Genistein
ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體Hpt/HP(Mouse Haptoglobin)檢測(cè)試劑盒 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP 檢測(cè)試劑盒 結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Hpt/HP (Rabbit Haptoglobin) 檢測(cè)試劑盒 兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) 檢測(cè)試劑盒 胎盤核糖核酸抑止劑* 規(guī)格: 48T/96T
HPL(Human placenta lactogen) 檢測(cè)試劑盒 胎盤催乳素* 規(guī)格: 48T/96T
Hp-IgM(Human Helicobacter pylori IgM) 檢測(cè)試劑盒 幽門螺旋桿菌IgM* 規(guī)格: 48T/96T
Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) 檢測(cè)試劑盒 幽門螺旋菌IgG* 規(guī)格: 48T/96T