详细介绍
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 |
英文名称 | ADORA2B |
规格 | 0.2ml |
?
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存??固逡话惚冉衔榷ǎ?/font>-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum短短芽胞杆菌 Brevibacillus brevis
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus
人腺细胞厚垣孢普可尼亚菌 Pochonia chlamydosporia
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae热带假丝酵母 Candida tropicalis
人膀胱平滑肌细胞*培养基人小气道上皮细胞*培养基
中国台湾根霉 Rhizopus formosensis清酒酵母 Saccharomyces sake
苏云金芽胞杆菌阿莱亚种 Bacillus thuringiensis subsp. alesti大鼠胰腺星状细胞*培养基
美味侧耳 Pleurotus sapidus嗜酸杆菌 Lactobacillus acidophilus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum海生嗜盐球菌 Maricoccus halophilus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae黄色篮状菌
RK1(大鼠肾细胞)胶质芽胞杆菌 Bacillus mucilagisus
泡盛曲霉 Aspergillus awamori日本根霉 Rhizopus japonicus
热带假丝酵母 Candida tropicalisSUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系)
接触蛋白1(CNTN1)ELISA Kit for Contactin 1 (CNTN1)规格:48T/96T
S100钙结合蛋白A8(S100A8)ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8)规格:48T/96T
跨膜蛋白27(TMEM27)ELISA Kit for Transmembrane Protein 27 (TMEM27)规格:48T/96T
胞外5'-核苷酶(NT5E)ELISA Kit for 5'-Nucleotidase, Ecto (NT5E)规格:48T/96T
整合素αV(ITGαV)ELISA Kit for Integrin Alpha V (ITGaV)规格:48T/96T
围滴蛋白4(PLIN4)ELISA Kit for Perilipin 4 (PLIN4)规格:48T/96T
再生胰岛衍生蛋白3γ(REG3γ)ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g)规格:48T/96T
淀粉样前体蛋白(APP)ELISA Kit for Amyloid Precursor Protein (APP)规格:48T/96T
桥粒芯胶粘蛋白3(DSC3)ELISA Kit for Desmocollin 3 (DSC3)规格:48T/96T
免疫球蛋白A1(IgA1)ELISA Kit for Immuglobulin A1 (IgA1)规格:48T/96T
SRC/FGR/YES相关FYN癌基因(FYN)ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN)规格:48T/96T
DNA基转移酶1(DNMT1)ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1)规格:48T/96T
腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体Bacillus sp.分离基物: 泥样提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 0223生长条件: 30℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Botryosphaeria ribis Grossenb. & Duggar分离基物: 富士苹果枝干病?单个分生孢子分离菌株提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 14生长条件: 25存储条件: 定期移植法
Bacillus pumilus分离基物: 钻取滇池底泥提供形式: 斜面培养物模式菌株: no应用领域: 滇池磷沉积的研究培养基: 2生长条件: 37℃存储条件: 真空冷冻干燥法;定期移植法
Saccharopolyspora hirsuta提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 生物转化Pravastatin培养基: CM0038生长条件: 28C存储条件: 真空冷冻干燥
Bacillus megaterium分离基物: 土壤提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 832生长条件: 30℃存储条件: 真空冷冻干燥法
Agaricus blazei Murrill分离基物: 子实体提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no培养基: 14生长条件: 25存储条件: 定期移植法
Ochrobactrum intermedium分离基物: 土壤提供形式: 斜面培养物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 分类、研究,可以用来农田土壤及环境修复微生物制剂。培养基: 0002生长条件: 28℃存储条件: 真空冷冻干燥法;矿物油法
天蓝吸水链霉菌种属: Streptomyces coeruleohygroscopicu提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: daunomycin 及其它蒽环类抗生素培养基: 0012生长条件: 28℃存储条件: 液氮超低温冻结法;真空冷冻干燥法
Streptomyces sp.分离基物: 盐土提供形式: 冻干物安全等级: 1模式菌株: no应用领域: 环境培养基: CM0237生长条件: 28C存储条件: 真空冷冻干燥