详细介绍
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 周期素B3抗体 |
英文名称 | Cyclin B3 |
规格 | 0.2ml |
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抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存??固逡话惚冉衔榷?,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
磺保泰松标准品 规格:200mg 英文名称:Sulfinpyrazone
异舒普林盐盐标准品 规格:200mg 英文名称:Isoxsuprine Hydrochloride
一水天冬酰标准品 规格:200mg 英文名称:Asparagine Mohydrate
糖二钙标准品 规格:200mg 英文名称:Calcium Saccharate
芹菜苷元7葡萄糖标准品 规格:30mg 英文名称:Apigenin7glucoside
麦角固标准品 规格:50mg 英文名称:Ergosterol
平标准品 规格:100mg 英文名称:Clozapine
平分离度用混合物标准品 规格:30mg 英文名称:Clozapine Resolution Mixture
盐依达比星标准品 规格:50mg 英文名称:Idarubicin Hydrochloride
素标准品 规格:200mg 英文名称:Testosterone Propionate CIII
NFmocN'三基D半胱 进口、国产 FmocDCys(Trt)OH 含量:特纯,98%
NFmocN'三基L组 进口、国产 FmocHis(Trt)OH 含量:特纯,98%
Nβ酰L组 进口、国产 LCarsine 含量:BR,99%
N基?;? 进口、国产 ACES 含量:FMP,90%
N基81磺 进口、国产 1,8ANS 含量:高纯
N酰L缬酰甘酰L精对基盐盐 进口、国产 NBZValGlyArgPNA•HC1 含量:BR,98%
N酰甘 进口、国产 HippuricAcid 含量:BR,99%
N苄基甘酯 进口、国产 NBenzylglycineethylester 含量:BR,97%
N苄氧基L酪酯 进口、国产 BTEE 含量:BR,98%
N苄氧羰基DL基 进口、国产 ZDLphenylalanine 含量:特纯,98%
周期素B3抗体环化核苷调控阳离子通道蛋白亚型4Doxapram hydrochloride monohydra别名: 分子式: C24H33ClN2O3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
HEAT重复内含蛋白8蛋白抗体Depofemin别名: 分子式: C26H36O3性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
雄激素调节样蛋白抗体Ethynyl estradiol别名: 分子式: C20H24O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
雄激素调节蛋白2抗体Quinestrol别名: 分子式: C25H32O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
角化蛋白S100A18抗体tracaine hydrochloride别名: 分子式: C15H25ClN2O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
丙型肝炎病毒NS4B抗体Prilocaine别名: 分子式: C13H20N2O性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
异质性核糖核蛋白C1/C2抗体Dibucaine hydrochloride别名: 分子式: C20H30ClN3O2性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词:
异质性核糖核蛋白RPrilocaine hydrochloride别名: 分子式: C13H21ClN2O性状: Powder纯度: 98.0%特色服务: 随货提供1H-NMR等报告关键词: