详细介绍
抗体制备过程:
1.材料与试剂
a.提取的动物 Ig
b.弗氏*佐剂和弗氏不*佐剂
c.青霉素和链霉素
d.实验动物 兔
e.其它材料及试剂
2、选择实验活体。
3、进行动物免疫实验。
4、试取血样进行测试,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,杀死实验活体,采集全部血清。
6、纯化出抗体。
7、鉴定抗体。胎牛血清(无菌采制)
公司专业供应的抗体,抗体是用于化学反应、分析化验、研究实验、教学实验、化学配方使用的纯净化学品,产品品质,价格实惠,多种规格供应,售后完善。
产品名称 | 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体 |
英文名称 | AF10 |
规格 | 0.1ml |
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抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存??固逡话惚冉衔榷?,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
蓝色犁头霉 Absidia coerulea
羊肚菌属 Morchella sp.
鸡白痢沙门氏菌 Salmonella pullorum
滕梨根
阪崎肠杆菌 Enterobacter sakazakii
副溶血弧菌 Vibrio parahaemolyticus
产气荚膜梭菌 Clostridium perfringens
枯草芽孢杆菌枯草亚种 Bacillussubtilissubsp.subtilis
里氏木霉 Trichoderma reesei
枯草芽胞杆菌 Bacillus subtilis
普通琼斜面培养基(PH8.0.2)250克Common Nutrient Agar一般细菌的培养,分离培养霍乱弧菌,埋迪霉菌鉴定用
PDP琼250克King Medium A绿脓菌色素测定
M-H琼平板10块M-H Agar Plate
沙保弱氏琼平板10块沙保弱氏琼平板
血琼平板50块Blood Agar Plate营养需求较高的细菌培养
SS琼平板10块SS Agar Plate沙门菌属和志贺菌属细菌的分离培养
甘露醇发酵培养基250克Mannitol Ferment Medium肠道杆菌的鉴别,细菌甘露醇发酵试验
普通肉汤琼平板50块Nutrient Agar Plate一般细菌的培养和细菌总数的测定
克氏铁琼斜面平板10支KIA Plate
弧菌选择琼平板10块TCBS Agar Plate
伊红美兰琼平板10块EMB Agar Plate肠道革兰氏阴性菌的分离培养
中国蓝琼平板10块China Blue Agar Plate
髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗体GP-II(Mouse Glycogen phosphorylase II)检测试剂盒 糖原磷酸化酶同工酶II* 规格: 48T/96T
GP-II(Human Glycogen phosphorylase II) 检测试剂盒 糖原磷酸化酶同工酶II* 规格: 48T/96T
GP-II 检测试剂盒 糖原磷酸化酶同工酶II* 规格: 48T/96T
GPI(Human glycophosphatidylinositol) 检测试剂盒 糖磷脂酰肌醇* 规格: 48T/96T
GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) 检测试剂盒 葡萄糖6磷酸异构酶* 规格: 48T/96T
GPC-3(Human Glypican-3) 检测试剂盒 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3* 规格: 48T/96T
GP-BB(Mouse Glycogen phosphorylase BB)检测试剂盒 糖原磷酸化酶同工酶BB* 规格: 48T/96T