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技術(shù)文章

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作分析表

閱讀:268          發(fā)布時(shí)間:2014-7-14

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作分析表

(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):   NaHCO3 1.59克   NaHCO3 2.93克   加蒸餾水至1000ml
(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15M   ELISA試劑盒KH2PO4 0.2克   Na2HPO4·12H2O 2.9克   NaCl 8.0克   KCl 0.2克   Tween-20 0.05% 0.5ml   加蒸餾水至1000ml
(3) 稀釋液:   牛血清白蛋白(BSA) 0.1克   加洗滌緩沖液至100ml   或以羊血清、兔血清等血清與洗滌液配成5~10%使用。
(4) 終止液(2M H2SO4):   蒸餾水178.3ml,逐滴加入濃硫酸(98%)21.7ml。
(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):   0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml   0.1M檸檬酸(19.2克/L) 24.3ml   加蒸餾水50ml。
(6) TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:   ELISA試劑盒TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml   底物緩沖液(PH5.5) 10ml   0.75%H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:   ABTS 0.5mg   底物緩沖液(PH5.5) 1ml   3%H2O2 2μl   (8) 抗原、抗體和酶標(biāo)記抗體。
(9) 正常人血清和陽性對照血清。
器材
(1) 聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標(biāo)板)40孔或96孔,ELISA試劑盒ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。
(2) 小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱,37℃孵育箱。

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