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淺談培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中的幾種試劑

閱讀:432          發(fā)布時(shí)間:2022-12-19

細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。在培養(yǎng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)中有有幾種試劑是經(jīng)常用到的。

1、高糖DMEM溶液 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(規(guī)格10×1L),溶入約總量的1/3的三蒸水,并用水洗凈包裝袋,在磁力攪拌器上攪拌30分鐘,加入NaHCO2 3.75克,補(bǔ)加水至最終量。用1N HCL調(diào)整PH為7.2,0.22μm濾膜抽濾除菌,分裝-20℃保存,使用時(shí)加10%的胎牛血清及雙抗溶液(最終濃度:青霉素100U/ml,鏈霉素 100μg/ml)

2、胎牛血清 使用前56℃水浴30分鐘滅活,無(wú)菌條件下分裝成10ml包裝,-20℃保存。用時(shí)以10%濃度注入培養(yǎng)液中。

3、 青霉素、鏈霉素雙抗溶液 青霉素100萬(wàn)單位及硫酸鏈霉素1g無(wú)菌條件下溶于消毒三蒸水10ml,分裝,-20℃保存。使用時(shí)每1000ml培養(yǎng)液加入青、鏈霉素混合液1ml,最終濃度為青霉素100單位/ml,鏈霉素100μg/ml。

4、磷酸鹽溶液(PBS): NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分別溶于1000ml三蒸水中,調(diào)節(jié)PH值至7.4高壓蒸氣滅菌,分裝后4℃保存。

5、胰蛋白酶溶液 用三蒸水制備成0.25%濃度,0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存。

6、0.1%明膠溶液 稱取明膠粉劑0.1g于燒杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分?jǐn)嚢柚疗鋡an全溶解,0.22μm濾膜抽濾除菌,4℃保存。




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