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其他ELISA試劑盒的注意事項
閱讀：159 發(fā)布時間：2021-4-2其他ELISA試劑盒注意事項：
（1）IgG ：血清中含量，因此是重要的抗感染分子，包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體，結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能（調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)），穿過胎盤，保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
（2）IgA ：分單體和雙體兩種。前者存在血清中，后者存在于黏膜表面及分泌液中，是黏膜局部抗感染的重要因素。
（3）IgM ：是分子量大，體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體，具有很強的激活補體和調(diào)理作用，因此是重要的抗感染因子，且常用于診斷早期感染。
（4）IgD ：主要存在于成熟 B 細胞表面，是 B 細胞識別抗原的受體。
（5）IgE ：血清中含量少的抗體，某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到，參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
其他ELISA試劑盒操作步驟：
1、抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免疫吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
2、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力?？贵w的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時的濃度,并按公式計算交叉反應(yīng)率。
如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0,即該血清的特異性較好。
3、抗體親和力：是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol?？贵w親和力的測定對抗體的篩選,確定抗體的用途,驗證抗體的均一性等均有重要意義。