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pG6质粒简介,pG6质粒说明

2013-3-12  阅读(1722)

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pG6质粒是噬菌体颗粒载体,是为融合蛋白的单价展示设计的。来自辅助噬菌体的野生型pⅥ与噬菌体颗粒载体表达的pⅥ-cDNA的融合蛋白竞争合成原始的噬菌体颗粒。在多链接区域除了有一个额外的SalI位点以外,实际上噬菌体颗粒载体pG6A、pG6B、pG6C与载体pDONG6是等同的,pDONG6允许在gⅥ的3’末端进行eDNA文库克隆。从lac启动子转录可以产生双侧顺反子mRNA:*条顺反子在lacZ和gⅢ3’末端之间编码一个融合蛋白,而第二条顺反子包含了gⅥ-eDNA融合基因。gⅥ的核糖体结合位点控制着第二条顺顷反子的翻译,此位点位于gⅢ的3’末端。尽管卢-异丙基硫代半乳糖苷可诱导1ac启动子控制gⅥ-cDNA的表达,但是我们已经利用1ac启动子的渗漏性(在缺乏葡萄糖的条件下)来指导噬菌体展示的gⅥ融合蛋白的表达。

用于噬菌体展示编码cDNA产物的pG6家族载体环状图(a)和序列(b)。
此载体的原型是插人M13噬菌体基因Ⅵ的pUCll9载体。此系列的pG6载体能够在基因Ⅵ阅读框下游SfiⅠ与NotⅠ酶切之间的cDNA的大量克隆。该图已得到Nature America公司的授权

 

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