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上海宝叶生物科技有限公司
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A液（80ml）：1％氯化金，lml；双重蒸馏水，79ml。
B液（20m1）：1％柠檬酸钠，4ml；1％单宁酸，0.lml；双重蒸馏水，15．8ml。25mmol/L K2C03，0．1ml；
将上述A液加热到60℃，然后将B液快速加入到A液中，继续搅拌，在极短的时间内加热到煮沸（大约10min），此时颜色由黑一蓝一亮红（近似红葡萄酒颜色）变化。pH调到所需要求（根据所标记蛋白质种类的不同，所需的pH也不一样）。上述用量合成的胶体金为10nm，根据所加入鞣酸（或称单宁酸）量的不同，可合成3—17nm颗粒大小的胶体金，见表。
鞣酸－柠檬酸钠还原法制备方案
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│ │ B液 │ A液 │
│ 颗粒直径/llm │ │ │
│ ├──────────────────────────────┼───────────┤
│ │1％柠檬酸钠/ml 0．1mol/L K2C03/ml l％鞣酸/ml H20/ml │l％氯化金/ml HzO/ml │
├─────────┼──────────────────────────────┼───────────┤
│ 5 │ 4 0．2 0．7 15．1 │ 1 79 │
│ 10 │ 4 0．025 O．1 15．875 │ l 79 │
│ 15 │ 4 O．0025 0．02 15．9875 │ 1 79 │
└─────────┴──────────────────────────────┴───────────┘
A、B两液混合后颜色改变的时间，在制备过程中基本以此表变化来决定加温见表
A、B两液混合后颜色改变所需的时间
┌───────┬────────┬───────┬───────┬────────┬────────┐
│ 颗粒直径/nm │ 变蓝时间/s │变红时间/min │ 颗粒直径/nm │ 变蓝时间/s │ 变红时间/min │
├───────┼────────┼───────┼───────┼────────┼────────┤
│ 5 │ 2 │ 3 │ 15 │ 300 │ 45 │
│ 10 │ 10 │ 10 │ │ │ │
└───────┴────────┴───────┴───────┴────────┴────────┘
在鞣酸—柠檬酸钠还原法中，柠檬酸钠是主要的还原剂；而鞣酸则具有双重作用，既起还原作用，也有?；ぷ饔?，它控制着“晶核”的形成过程，故可改变鞣酸的用量来制备不同颗粒的胶体金。
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