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上海寶葉生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員·6年
- 聯(lián)系人：
- 蔣先生
- 電話：
- 手機(jī)：
- 13391038817
- 地址：
- 上海市嘉定區(qū)新源路155弄
- 個(gè)性化：
- www.shjsbio.com
- 網(wǎng)址：
- www.shjsbio.com
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儀器用具：
微量離心機(jī)
冰浴
Mupid II 迷你電泳槽及鑄膠器
UV transilluminator 及影像分析系統(tǒng)
防護(hù)面罩
藥品試劑：
限制酶：BamHI, HindIII （20 U/μL, BioLabs）
10×NE Buffer BamHI （0.1 M Tris-HCl, pH 7.9; 0.1 M MgCl2; 1.5 M NaCl; 10mM dithiothreitol）
100×BSA （10 mg/mL bovine serum albumin） 使用前稀釋十倍成10×無菌水
方法步驟：
1） 正反應(yīng)株，接種于3 mL LB/Amp 培養(yǎng)基，于37℃震蕩培養(yǎng)過夜后，以2.1 的方法抽取質(zhì)體。
2） 每一株每反應(yīng)各取3 μL 質(zhì)體，另取pQE31 及pBlueGus 每反應(yīng)各3 μL，分別依下表進(jìn)行HindIII 及BamHI 切割。
3） 以1% agarose gel 進(jìn)行電泳分析，由電泳圖譜挑選帶有gus DNA 片段的重組質(zhì)體。
?? 照相后的電泳膠片不要丟掉，可繼續(xù)進(jìn)行Southern 轉(zhuǎn)印。
限制酶分析請(qǐng)依照下列表格加入：
# 各管置請(qǐng)于37℃反應(yīng)至少1 h。
