glenresearch 10-1536-02說明書
Fmoc 氨基改性劑 C6 dT
5'-二甲氧基三苯甲基-5-[N-((9-芴基甲氧基羰基)-氨基己基)-3-丙烯酰亞胺]-2'-脫氧尿苷,3'-[(2-氰乙基)-(N,N-二異丙基)]-亞磷酰胺
描述
我們的 NHS 酯衍生物系列已擴展到包括 NHS-Carboxy-dT-CE Phosphoramidite。通過制備羧基修飾劑 C10 的 dT 類似物，可以標(biāo)記寡核苷酸內(nèi)的一個或多個位點。當(dāng)亞磷酰胺不可用時，這開辟了在寡核苷酸內(nèi)標(biāo)記任意數(shù)量的不同染料或分子的可能性。這樣做很簡單，可以在合成儀之外手動完成，甚至可以在 DNA 合成儀上以全自動方式完成。我們從未發(fā)現(xiàn)允許從氨基修飾劑中去除 TFA 基團而寡核苷酸仍然附著在支持物上的條件。我們能夠通過使用 9-芴基甲氧基羰基 (Fmoc) 保護基團來解決這個問題。使用兩步程序去除 Fmoc 組，第一個步驟是使用 1% 二異丙胺的乙腈溶液去除氰乙基保護基團并從合成柱中沖洗形成的丙烯腈，第二個步驟是使用 10% 哌啶的 DMF 溶液去除 Fmoc 基團。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-Amino-Modifier C6 dT Phosphoramidite 作為核苷選項，提供 Amino-Modifier Serinol Phosphoramidite 作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-氨基改性劑 C6 dT 亞磷酰胺作為核苷選項，氨基改性劑絲氨醇亞磷酰胺作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。在柱上如此形成的氨基可以與多種活化酯反應(yīng)。我們提供 Fmoc-氨基改性劑 C6 dT 亞磷酰胺作為核苷選項，氨基改性劑絲氨醇亞磷酰胺作為非核苷選擇。我們還提供 S-Bz-硫醇改性劑 C6-dT 以加入用于寡核苷酸合成的硫醇改性劑行列。硫醇改性劑 C6-dT 可以像往常一樣添加到序列中的所需位置。
細(xì)節(jié)
用法
- 耦合：無需對合成器制造商推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法進行更改。
- 脫保護：為了在柱上標(biāo)記胺，依次用 1 ml 載體、10% 二乙胺/ACN（去除氰乙基保護）和 20% 哌啶/DMF 去除 Fmoc 保護10 分鐘。用 DMF 和 ACN 沖洗載體以去除哌啶。將 NHS 酯（過量 5-10 倍）溶解在 0.5 ml 含有 1% 二異丙基乙胺的適當(dāng)溶劑中，并在 35 oC 下用 CPG 孵育 2-4 小時以標(biāo)記胺。沖洗支架以去除多余的標(biāo)簽并正?；蛟谂c耦合標(biāo)簽兼容的條件下切割/去保護。
| 規(guī)格 |
|---|
| 沖淡 | 無水乙腈 |
| 貯存 | 冷凍儲存，-10 至 -30°C，干燥 |
| 穩(wěn)定 | 2-3天 |
稀釋/偶聯(lián)數(shù)據(jù)
下表顯示了包裝尺寸數(shù)據(jù)，以及基于正常啟動程序的溶液稀釋和近似耦合。
ABI 392/394
| 目錄 ＃ | 包裝尺寸 | 克/包 | 0.1M 刻度 (毫升) | 添加的大約數(shù)量 |
|---|
| | LV40 | LV200 | 40納米 | 0.2μm | 1μm | 10μm |
|---|
| 10-1536-02 | 0.25 克 | .25 克 | 2.23 | 61 | 36.6 | 22.88 | 16.64 | 12.2 | 3.05 |
| 10-1536-90 | 100 微摩爾 | .112克 | 1 | 20 | 12 | 7.5 | 5.45 | 4 | 1 |
加快
| 目錄 ＃ | 包裝尺寸 | 克/包 | 稀釋（毫升） | 添加的大約數(shù)量 |
|---|
| | 摩爾濃度 | 50納米 | 0.2μm | 1μm | 15μm |
|---|
| 10-1536-02 | 0.25 克 | .25 克 | 3.33 | 0.07 | 60.2 | 37.63 | 27.36 | 3.76 |
| 10-1536-90 | 100 微摩爾 | .112克 | 1.5 | 0.07 | 23.6 | 14.75 | 10.73 | 1.48 |
