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602次cambcollabs三螺旋肽简介
CambCol实验室合成胶原样三螺旋肽用于研究用途。它们有不同的结构形式,用于不同的目的,但它们的关键共同特征是[GXX']n基序,这是
三螺旋组件。我们的大多数肽含有GPP或GPO重复序列(Gly-Pro-Pro或Gly-Pro-Hyp)。
这些富含亚氨基酸的序列形成稳定的三螺旋结构,在高于37°C(通常为45-50°C)的温度下熔化(展开)[1,2]。我们制造以GPP或GPO重复序列为主要成分的肽,
它保持三螺旋结构,以及另一个序列(例如结合整合素的GFOGER基序)作为客体序列插入GPP或GPO宿主序列框架的肽[3]。在很多情况下,
在N端和C端都包含含有Cys的三联体,以允许出于特定目的交联Cys残基巯基[4]。这是我们受体特异性肽的常见形式。
为您的特定应用格式化的肽:
•对于蛋白质或细胞结合分析的表面涂层,含半胱氨酸的肽可能是好的。自发形成的二硫化物可能会导致肽的低聚合物的存在,其中协同结合会促进表面吸附[5]。在我们手中,用于蛋白质结合研究的96孔板在这种情况下工作良好。
例如i-II-28,GPC[GPP]5GPP雾剂[GPP]5GPC酰胺
•如果肽仅在溶液中使用,那么不含Cys的三联体宿主序列可能是好的,因为不会发生自发氧化聚合[5]。竞争结合分析中使用的此类肽[4,6],
例如,它将产生更简单的结合动力学。
例如Si-II-28、[GPP]5G雾剂[GPP]5-酰胺
•使用肽制备蛋白质-肽复合物用于结构研究,最小化肽的长度可能是有用的。在这种情况下,[GPO]3宿主序列允许相对较短但同样稳定的肽
待生产(Tm)≥ 20摄氏度[7]。N-末端的乙?;ü醇涞绾膳懦馓岣呶榷ㄐ浴U庵植呗钥赡苁视糜谑褂?°C结晶条件的晶体学研究,但较长的肽、[GPO]4宿主将为室温结晶提供更高的热稳定性。
例如Ci-II-28、[GPO]2雾剂[GPO]3-酰胺
•衍生肽,例如含有荧光素或其他荧光团,或含有生物素,可用于细胞表面标记研究。
例如Fi-II-28,FITC-[GPP]5G雾剂[GPP]5-酰胺
•胶原工具包,包含胶原II、胶原III或胶原XIII COL结构域全序列的重叠三螺旋肽库,可用于将胶原结合蛋白映射到
这些胶原蛋白的主要序列[2,8,9]。我们可以提供预先涂在96孔板上的工具包,或者我们可以在实验室与您合作,绘制目标蛋白质的结合位点。
一个例子是II-28,GPC[GPP]5geagaoglvgprgergfogersogaq[GPP]5GPC酰胺
如果你的配体结合位点已知,可以提供单独的工具包肽,我们将与你合作,在未知的地方更紧密地定义结合位点。CambCol Laboratories已经接管了美国剑桥法恩代尔实验室collagentoolkit网站的权益。
搬运和储存
肽粉
•在-20°C(零下20°C)下储存,粉末肽将无限期保存。我们提供了所提供肽的准确重量(通常为1.1毫克),您应在0.01M醋酸中溶解至至少2.5毫克/毫升。
在4°C下储存一晚,以便在使用前形成完整的三螺旋。你可以等分,比如说20µl的批次,快速冷冻,并根据你的喜好在-20°C(零下20°C)或-80°C(零下80°C)下储存。
•您的工作库存小份可在+4°C(+4°C)下储存,以便立即使用(最多4周)。避免长时间储存稀释溶液(<1 mg/ml),否则肽可能会因吸附到管壁或在非常稀释的溶液中展开三螺旋而丢失。
•避免多次重新冷冻和解冻,因为这可能会导致肽沉淀。如果你能在溶液中看到颗粒物质(肽聚集体),*旋涡(2分钟)以分散它们。
或者,你可以用超声波检查,注意不要让管子过热。CRP-XL以溶液形式提供
•我们可以提供CRP-XL作为粉末,按上述方式处理,或作为冷冻溶液≥ 在0.01M醋酸中加入2.5mg/ml。你可以解冻、等分、速冻,并将等分保存几个月。解冻时,检查
可见聚集体的存在。如果存在,通过上述大范围涡流和/或超声波分散。
•不要加热CRP-XL悬浮液(一些方案要求对非交联肽进行热变性,以恢复单链状态,然后通过冷却重新折叠)。我们认为这一过程将是有害的
对于CRP-XL,由于变性但交联的肽不太可能准确地重新折叠。
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