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synvolux SAINT蛋白说明书

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synvolux SAINT蛋白说明书

SAINT - PROTEIN

P R O T E I N D E L I V E R Y S Y S T E M

 

SAINT蛋白

为使用 SAINT-蛋白(目录号:编号SP-3004-01、SP-3004-02、SP-3004-04)。本方案中的量适用于 24 孔板的单个孔。其他格式请参见本页底部的表 1。P RO TE IN DE LI VE RY SY SS TE M

 

一般转染方案

 

1. 准备细胞进行转染。

  • 贴壁细胞:转染前 1 天,将细胞接种于 0.5 mL 生长培养基中,使细胞在转染时达到 80% 融合。转染前,立即用不含血清的相同培养基(无血清培养基)替换生长培养基。
  • 悬浮细胞:转染当天,在 0.5 mL 无血清培养基中以其大密度的约 80% 铺板细胞。

2. 使 SAINT-蛋白小瓶达到室温。

3. 充分涡旋 SAINT-蛋白约 30 秒。

4. 使用 1:10 的蛋白 (µg) 与 SAINT-蛋白 (µl) 比例制备复合物。对于每份转染样品,按照以下方法制备复合物:

a. 在 50µl PBS 中稀释 2µg 蛋白。

b. 向蛋白/PBS 溶液中加入 20µl SAINT-蛋白,并轻轻重悬。

5. 在室温下孵育混合物 5-10 min(溶液可能出现浑浊)。

6. 向细胞中加入复合物 (70µl)。

7. 在 CO2 培养箱中于 37 ℃ 下孵育 4 小时。

8. 如果需要更长时间的孵育,加入 50µl 血清,将血清浓度调整至 8%。

9. 进行检测。

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