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上海起发实验试剂有限公司

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omegabiotek M3298-01说明书

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omegabiotek M3298-01说明书

 

Mag-Bind®cfDNA试剂盒

使用磁珠从血浆或血清中分离循环的无细胞DNA。

SKU:M3298-01

类别:循环DNA

标签:cfDNA,M3298-00,M3298-01,M3298-02,NIPT

概观

Mag-Bind®cfDNA试剂盒专为从500-8,000μL血浆或血清样品中快速可靠地分离循环DNA而设计。Mag-Bind®cfDNA试剂盒可以手动或在自动化平台上进行处理。该程序消除了对漏斗和真空步骤的需要,在自动化协议中提供免提操作。

*配方的结合缓冲液允许以自动化形式处理大量样品,允许在24孔板形式的单个孔中处理4mL血清或血浆。Mag-Bind®颗粒CH的磁响应允许在需要大体积的步骤中快速磁化,并且高结合容量允许减少所需的磁性颗粒量,从而将4mL血清或血浆样品的洗脱体积降低至50μL 。

Mag-Bind®cfDNA试剂盒也已自动化,可在Hamilton平台上处理8 mL样品。请联系我们获取自动化支持。

协议适用于以下自动化平台:

  • HamiltonMicrolab®STAR
  • HamiltonMicrolab®NIMBUS
  • KingFisher™,BioSprint®和MagMAX®96

产品规格

仅供研究使用。不用于诊断过程。

特征产品规格
样品类型血浆/血清
样本量500-8000μL
技术磁珠
处理手动或自动
自动化
处理时间96(1mL)样品2小时
格式管,24孔,96孔
洗脱体积50μL

 

套件组件

Mag-Bind®颗粒CH

DS缓冲区

JSB缓冲区

GT7缓冲区

SPW缓冲区

洗脱缓冲液

蛋白酶K溶液

产品数据

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®cfDNA试剂盒纯化的无细胞DNA几乎没有基因组DNA物


图1. 来自4 mL血清的纯化DNA的电泳重叠。使用来自Omega Bio-tek和Company Q的试剂盒按照制造商推荐的方案纯化4mL未加标血清。在Agilent的TapeStation®2200上分析纯化的DNA。

使用Omega Bio-tek的Mag-Bind®fCRDNA试剂盒纯化的无细胞DNA的高质量和高产量Mag-Bind®cfDNA试剂盒


图2. 来自1 mL血清的纯化DNA的电泳覆盖图  。将剪切的细菌DNA掺入血清样品中并使用Omega Bio-tek的Mag-Bind cfDNA试剂盒和来自Company Q的基于柱的试剂盒进行分离。使用16s细菌特异性引物以1X和10X稀释度进行实时PCR。在Agilent的TapeStation®2200上分析纯化的DNA .Omega Bio-tek试剂盒能够捕获没有基因组DNA污染的循环无细胞DNA。相反,Company Q的洗脱液含有高分子量片段,表明在循环DNA分离中存在基因组DNA。

使用Omega Bio-tek的cfDNA试剂盒纯化的cfDNA不含PCR抑制剂


表1.  对从纯化的样品中分离的未稀释和10倍稀释的DNA一式三份进行具有16S细菌特异性引物的实时PCR [图2]。数据显示纯化的DNA不含PCR抑制剂,并且特定的cfDNA浓度高于公司Q.

使用Mag-Bind®cfDNA试剂盒可以回收小至50 bp的循环无细胞DNA


图3.  使用修改的方案可以回收小至50bp的DNA片段。加入50bp DNA梯度的血清用Mag-Bind®cfDNA试剂盒纯化。通过使用修改的协议,回收了较小的片段。

使用Mag-Bind®cfDNA试剂盒分析从8 mL血浆中纯化的cfDNA


图4.1。 使用Mag-Bind®cfDNA试剂盒纯化血浆样品。将纯化的DNA样品加载到TapeStation 2200上的D100高灵敏带上。


图4.2。 使用TapeStation软件分析图4.1中的凝胶图像。峰值和浓度数据显示8 mL自动化过程是成功的。


图4.3。 使用TapeStation软件分析图4.1中的凝胶图像。叠加显示纯化的DNA含有更多的cfDNA和小的基因组DNA污染。


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