haemtech荧光底物

Fluorogenic Substrates

基于ANSN的生成基质
的一般结构示出了基于6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）荧光底物的一般结构。在本发明化合物家族中，R1是三肽，其COOH末端残基通常是精氨酸。R2和R3可以是氢，烷基，芳基或环烷基。虚线表示各种丝氨酸蛋白酶的水解位点。

含有荧光报告基团6-氨基-1-萘 - 磺酰胺（ANSN）的底物是用于监测各种丝氨酸蛋白酶（1-12）的酶活性的有用化合物。在这类化合物中，ANSN报告基团与短的三肽序列连接（在R1位置）。设计肽序列以优化酶和底物之间的相互作用?？梢蕴砑拥絉2和R3位置的附加组分反映P'亚位点位置的变化，并且通常影响底物的动力学参数。作为有效底物的化合物在三肽和ANSN基团之间水解。一旦从肽部分切割，ANSN组的相对荧光增加约1000倍。

下页中确定的动力学特性将有助于选择合适的底物。已证明ANSN底物对因子VIIa（1-5,7,9,10,12）的分析特别有用。尽管单独的因子VIIa的底物水解速率相对较慢，但当将组织因子掺入测定系统时，几种化合物如化合物SN-17a在kcat中表现出大的变化。

使用信息：
基于ANSN的底物作为DMSO中的10mM储备溶液提供，并且通?？捎糜诜治雠ǘ确段?00nM至低至50pM的酶。ANSN底物通常以50至100μM的终浓度使用，并且可以在大多数生理缓冲液（即TBS，HBS，PBS等）中稀释至该终浓度。可以使用标准荧光计或荧光板读数器监测反应（荧光的相对变化）。仪器设置在以下波长（激发= 352nm，发射= 470nm）时可以使用动力学或终点模式。通过在发射光束中采用390至450nm长通截止滤光器，可以小化光伪影。

每种底物的动力学性质列于下表中，并且在表格下方列出了期刊参考列表以供使用实例。

DMSO中的储备底物溶液应在4°C或更低温度下冷冻保存，并应避光保存。在这些条件下，化合物将保持稳定超过一年。

SN-5 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物定价：请咨询

 安全数据表

SN-7 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-13a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-17a 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-17c 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-18 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-20 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-45 6-氨基-1-萘磺酰胺（ANSN）荧光底物

SN-54 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

SN-59 6-氨基-1-萘磺酰胺基（ANSN）荧光底物

参考

1. Butenas, S., et al., Biochemistry, 31, 5399 (1992).
2. Lawson, J.H., et al., J. Biol. Chem., 267, 4834 (1992).
3. Lawson, J.H., et al., Methods in Enzymology, 222, 177 (1993).
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5. Butenas, S., et al., J. Biol. Chem., 269, 25838 (1994).
6. Butenas, S., et al., Anal. Biochem., 225, 231 (1995).
7. Butenas, S., and Mann, K.G., Biochemistry, 35, 1904 (1996).
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9. Butenas, S., et al., J. Biol. Chem., 272, 21527 (1997).
10. Butenas, S., et al., Thromb. Haemost., 78, 1193 (1997).
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12. Butenas, S., et al., U.S.A. patent # 5,399,487.

出版物

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2. Butenas et al. Thromb Haemost 1997;78:1193-201.

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