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上海起发实验试剂有限公司

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使用PNA miRNA抑制剂的方案

时间:2018/9/5阅读:732
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    上海起发实验试剂有限公司
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PNA BIO INC致力于为基础研究和应用领域的实验室提供的研究产品和服务。

PNA Bio提供PNA(Peptide Nucleic Acid)产品,包括定制寡核苷酸,FISH探针,miRNA抑制剂,PNA钳夹探针和Fmoc单体。HPLC纯化后,它们与MS / MS数据一起提供> 95%的纯度。PNA产品由Panagene制造。

PNA Bio还提供工程化核酸酶服务,包括CRISPR / Cas9核酸酶(RGEN)合成,验证和Cas9蛋白以及敲除和敲入细胞系服务。

PNATM miRNA抑制剂   PNA miRNA Inhibitors

由于PNA比DNA或RNA更强地结合互补RNA,因此相对于基于RNA / DNA的miRNA抑制剂,它提供了更高的活性。此外,PNA miRNA抑制剂与细胞穿透肽(CPP)结合,使其无需转染试剂即可进入细胞。
已经显示PNA miRNA抑制剂的使用是体内有价值的工具。

主要特征

 PNAs™miRNA抑制剂具有高度序列特异性

 

 可以在不使用转染试剂的情况下使用PNAs TM miRNA抑制剂

 

 可以在不使用转染试剂的情况下使用PNAs TM miRNA抑制剂

 

 PNAs™miRNA抑制剂在细胞中具有长的半衰期,长达14天

 

 PNAs™miRNA抑制剂具有抗性和非常稳定的细胞核酸酶

 

 PNAs™miRNA抑制剂没有细胞毒性

目录号

描述

尺寸

PI - XXXX - 10

PNAs™miRNA抑制剂

10纳摩尔

PI - XXXX - 25

PNAs™miRNA抑制剂

25纳摩尔

PN - 1001 - 10

PNAs™miRNA抑制剂阴性对照

10纳摩尔

PN - 1001 - 25

PNAs™miRNA抑制剂阴性对照

25纳摩尔

PI - XXXX - FAM

PNAs™miRNA抑制剂

5纳摩尔

PN - 1001 - FAM

PNAs™FAM - 标记为阴性对照

5纳摩尔

 

使用PNA miRNA抑制剂的方案

 

PNATM miRNA抑制剂是针对成熟形式的miRNA而设计的。由于pna相对于dna具有较好的亲和力和特异性,是一种理想的分子生物学工具。 证明miRNA作为一种抗感试剂的作用。

 

我们的PNATM miRNA抑制剂与细胞穿透肽结合,只需将其添加到培养基中即可进入细胞。使用转染试剂可促进穿透。 miRNA抑制剂进入细胞。一般情况下,4~6小时后,细胞内可见PNA miRNA抑制剂。大效应出现在24~48小时之间。因为PNA对核酸酶和Pr都有抗性 抑制作用持续一周以上。

 

 

PNA miRNA抑制剂的治疗

 

细胞电镀

 

1.转染前1d,种子5.0×104细胞在0.5ml中接种24孔板,1.5×105细胞在1.5ml中接种6孔板,在合适的*培养基中不加抗生素。

 

在一夜之间培养细胞

 

PNA miRNA抑制剂的制备

 

顺着含有miRNA抑制剂的管子旋转。

 

在125升UL水溶液中,用50μL水或25毫摩尔回流10毫摩尔管,制成200μm原料。如果不*溶解,在60℃加热5min。

 

商店里-70华氏度。

 

  • PNA miRNA抑制剂如果保存得当,其溶液应稳定在1年以上。

 

 

miRNA抑制剂的治疗

 

(选项)将每口井的培养基替换为优选培养基,如OPTIMEM或*不含抗生素的培养基。

 

在60℃下加热PNA miRNA抑制剂10 min。

 

在OPTI-MEM中制备miRNA抑制剂混合物,用或不加转染试剂孵育15 min。

 

*在有转染试剂的情况下,miRNA抑制剂的推荐浓度为0.2~0.5μm(每200 ul培养基0.5ul),或1~2μm未转染试剂。

 

向细胞中加入miRNA混合物。

 

细胞孵育48小时。

 

*宜条件将由用户根据经验确定。

  • 实时PCR评价

 

  • 从培养的细胞中去除生长培养基。

 

  • 根据制造商的指示,分别使用PureLink™RNA试剂盒或miRNA分离试剂盒(LifeTechnologies)从样品中提取总RNA或miRNA。

 

  • **不使用TrIZOL进行总RNA提取,因为PNA-miRNA复合物被TrIZOL解离。

 

  • 三。使用TaqMan®microRNA反转录试剂盒(Apple BioSosits)进行10 ng总RNA或miRNA的逆转录反应。TaqMan®Unvior的实时PCR反应 AL PCR硕士混合(应用生物系统)根据制造商的指示。

 

参考

Oh SY et al. (2010) PNA-based antisense oligonucleotides for micrornas inhibition in the absence of a transfection reagent. Oligonucleotides 20(5):225-30.

 

Fabbri E et al. (2011) Modulation of the Biological Activity of microRNA-210 with Peptide Nucleic Acids (PNAs). Chem Med Chem 6(12):2192-2202.

 

Jiang L et al. (2011) Identification and experimental validation of G protein alpha inhibiting activity polypeptide 2(GNAI2) as a microRNA-138 target in tongue squamous cell carcinoma. Hum Genet 129(2):189-97

 

Gaglione M et al. (2011) PNA-based artificial nucleases as antisense and antimiRNA oligonucleotide agents. Mol Biosyst 7(8):2490-9

 

 

Pnabio 部分产品列表

货号

品名

规格

品牌

CP01-20

Reconstitutes to 1 mg/ml, 120 pmol (6 uM x 20 ul)

20 ug

pnabio

CP01-50

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CP01-200

Reconstitutes to 1 mg/ml, 1200 pmol (6 uM x 200 ul)

200 ug (50 ug x 4)

pnabio

CP02

Reconstitutes to 5 mg/ml, 1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CP03

Reconstitutes to 5 mg/ml, 6000 pmol (30 uM x 50 ul x 4 tubes)

1 mg (250 ug x 4)

pnabio

CP04-100

Liquid form 1 mg/ml, 600 pmol (6 uM x 20 ul x 5 tubes)

100 ug (20 ug x 5)

pnabio

CP04-500

Liquid form 5 mg/ml, 3000 pmol (30 uM x 20 ul x 5 tubes)

500 ug (100 ug x 5)

pnabio

CN01

Reconstitutes to 1 mg/ml, 300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CN02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

CD01

Reconstitutes to 1 mg/ml,  300 pmol (6 uM x 50 ul)

50 ug

pnabio

CD02

Reconstitutes to 5 mg/ml,1530 pmol (30 uM x 50 ul)

250 ug

pnabio

F1001

C-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1002

C-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1003

C-rich telomere probe,  Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1004

C-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1005

G-rich telomere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F1006

G-rich telomere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F1007

G-rich telomere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F1008

G-rich telomere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F1009

C-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1010

G-rich telomere probe, FITC labeled

5 nmole

pnabio

F1013

   C-rich telomere probe,     Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1014

   G-rich telomere probe,   Alexa Fluor 647 labeled

5 nmole

pnabio

F1020

TelC probe for arthropods, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F2001

C-rich telomere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3001

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F3002

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3005

Centromere probe, Cy5 labeled

5 nmole

pnabio

F3004

Centromere probe, Alexa Fluor 488 labeled

5 nmole

pnabio

F3008

Centromere probe, Biotin labeled

5 nmole

pnabio

F3003

Centromere probe, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

F3006

Centromere probe, FAM labeled

5 nmole

pnabio

F5001

CAG repeats, Cy3 labeled

5 nmole

pnabio

G2001-3

A set of 4 PNA oligos against human globin,

3 nmole

pnabio

G2001-10

A set of 4 PNA oligos against human globin

10 nmole

pnabio

MP01-25

ggcaagtgttcttcgga

25 nmole

pnabio

MP01-50

ggcaagtgttcttcgga

50 nmole

pnabio

PP01-25

ggctcaaccctggacag

25 nmole

pnabio

PP01-50

ggctcaaccctggacag

50 nmole

pnabio

RV01

Surrogate reporter vector with GFP for FACS

5 ug

pnabio

RV02

Surrogate reporter vector with GFP and H2KK for MACS

5 ug

pnabio

RV03

Surrogate reporter vector with GFP and Hygromycin-R

5 ug

pnabio

CV01

Cas9 co-transfection vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV02

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV03

Cas9, RFP, puromycin R expression vector (CMV promoter)

5 ug

pnabio

CV11

Cas9 co-expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV12

Cas9, Hygromycin R, and GFP expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

CV13

Cas9, RFP, and Puromycin R expression vector (EF1a promoter)

5 ug

pnabio

FMA-1001

Fmoc-A(Bhoc)-aeg-OH

1 g / 2 g

pnabio

FMG-1001

Fmoc-G(Bhoc)-aeg-OH

1 g / 2 g

pnabio

FMC-1001

Fmoc-C(Bhoc)-aeg-OH

1 g / 2 g

pnabio

FMT-1001

Fmoc-T-aeg-OH

1 g / 2 g

pnabio

FMO-1001

Fmoc-AEEA-OH

1 g / 2 g

pnabio

PNAC-1002

PNAClamp KRAS Kit (v2)

30 tests

pnabio

PNAC-1003

PNAClamp KRAS Kit (v3)

25 tests

pnabio

PNAC-1004

PNAClamp KRAS Kit (plus)

25 tests

pnabio

PNAC-1006

PNAClamp KRAS Kit (v4)

25 tests

pnabio

PNAC-1101

PNAClamp NRAS Kit (v4)

25 tests

pnabio

PNAC-2001

PNAClamp BRAF Kit

50 tests

pnabio

PNAC-3002

PNAClamp EGFR Kit

25 tests

pnabio

PNAC-4002

PNAClamp PIK3CA Kit

25 tests

pnabio

PNAC-5001

PNAClamp IDH1 Kit

25 tests

pnabio

 

 

 

上海起发实验试剂有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

2:产品种类齐全,经营超过700多品牌,基本涵盖所有生物实验试剂耗材。

3:提供加急服务,货品一般1-2周到货。

4:富有竞争力的价格优势,绝大部分价格有优势。

5:多年积累良好的信誉,大部分客户提供货到付款服务??突Оㄇ寤?、北大、交大、复旦、中山等100多所高校,ROCHE,阿斯利康、国药、fisher等知药企。

6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司授权代理。

7:我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发,欢迎合作。

 

 

Pnabio代理   Pnabio中国代理   Pnabio北京代理     Pnabio上海代理

 

 

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