凝膠成像系統(tǒng)的操作規(guī)范須知

當(dāng)前的凝膠成像品牌可謂非常多，廣為熟知的有美國(guó)ProteinSimple、美國(guó)BioRad、美國(guó)UVP，英國(guó)UVI，英國(guó)Syngene，美國(guó)Carestream，法國(guó)VILBER LOURMAT，以色列DNR，美國(guó)GE等等。

凝膠成像系統(tǒng)原理：

樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會(huì)對(duì)未知樣品作一個(gè)定性分析。這個(gè)就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對(duì)其作定性分析，就可以確定它的成份和性質(zhì)。

樣品對(duì)投射或者反射光有部分的吸收，從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會(huì)有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度，通過(guò)于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻，較為大限度的消除了光密度不均造成的對(duì)結(jié)果的影響。

下面小編問(wèn)您詳述一下凝膠成像系統(tǒng)的操作步驟：

凝膠成像系統(tǒng)的操作步驟：

1．打開(kāi)凝膠成像系統(tǒng)開(kāi)關(guān)。

2．打開(kāi)電腦，打開(kāi)并進(jìn)入成像軟件。

ECL拍攝

將拍攝模式切換為“ECL模式”，將濾光輪轉(zhuǎn)到ECL位。選擇合適拍攝分辨率（有像素合并功能的機(jī)器都有這個(gè)功能），點(diǎn)擊“啟動(dòng)”。將樣品放置在樣品臺(tái)正中間，調(diào)整鏡頭的焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右，,然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，勾掉“負(fù)片”并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.（光圈越大，自動(dòng)曝光所需時(shí)間越短。）并先用單幀拍攝，拍攝一張Mark照片。關(guān)閉反射白光后給放置在化學(xué)發(fā)光成像板上的硝酸纖維素膜均勻加上發(fā)光液。將拍攝方式設(shè)置為“規(guī)則積分”，勾上“負(fù)片”，并設(shè)置的時(shí)間和張數(shù)，點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可。

普通凝膠拍攝

1．將拍攝模式切換為“普通模式”，將濾光輪轉(zhuǎn)到UV位（無(wú)綠光鏡輪的無(wú)需調(diào)整）。

2．選擇合適拍攝分辨率（機(jī)器有像素合并功能），點(diǎn)擊“啟動(dòng)”。

3. DNA膠拍攝：將DNA膠放置在紫外臺(tái)正中間，調(diào)整焦距使樣品占據(jù)窗口約80%左右，,然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.然后關(guān)閉反射白光，開(kāi)啟透射紫外，并微調(diào)，確保在紫外下處于清晰狀態(tài)。

蛋白質(zhì)膠拍攝：將蛋白質(zhì)膠放在拆疊白光板的中間，關(guān)閉反射白光，開(kāi)啟透射白光，然后點(diǎn)擊“自動(dòng)曝光”，并調(diào)整聚焦使預(yù)覽窗口中的樣品圖像清晰.。

4.在軟件界面點(diǎn)擊“拍攝”按鈕即可。

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