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雙抗體夾心法檢測HBsAg試劑盒
閱讀：1792 發(fā)布時間：2016-7-12關鍵詞：HBsAg試劑盒ELISA 簡介：ELISA法定量測定人血清、血漿或其它相關液體中ACA IgA含量。 產品報價說明： 產品名稱：HBsAg試劑盒ELISA 規(guī)格：96T/48T 運輸：2~8°保存運輸 服務：提供免費代測服務，提供。
以已知抗體(抗HBs)包被載體，然后將含有抗原的待檢標本加入，共同孵育后，抗原結合于包被抗體上，再加入酶標記特異抗體(酶標抗HBs)，酶標抗體連接到抗原上，zui后加入底物溶液，根據(jù)顏色反應來判定抗原含量。
使用目的：
本試劑盒用于測定人血清，血漿及相關液體樣本中乙肝表面抗原ELISA試劑盒（HBsAg）含量。
實驗原理
本試劑盒應用間接法測定標本中人乙肝表面抗原（HBsAg）水平。用純化的人乙肝表面抗原（HBsAg）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入已知濃度的乙肝表面抗原（HBsAg）標準品和未知濃度的HBsAg待檢樣品，溫育后，加入生物素標記的抗IgG抗體，再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙肝表面抗原（HBsAg）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人乙肝表面抗原（HBsAg）濃度。
一、材料
HBsAg試劑盒，本試劑盒含:
1、包被抗-HBs反應條 1瓶
2、酶結合物 1瓶
3、HBsAg陽性對照 1瓶
4、HBsAg陰性對照 1瓶
5、洗滌液:用前每瓶作1：20稀釋 1瓶
6、顯色劑（TMB）A 1瓶
7、顯色劑（TMB）B 1瓶
8、終止液 1瓶
二、方法
1、加入待測標本每孔0.05ml，并設HBsAg陽性對照2孔，HBsAg陰性對照2孔，空白對照1孔，然后加入酶結合物每孔1滴(0.05ml、空白對照孔不加)，充分混勻后置37℃孵育30分鐘。
2、洗板:棄去反應條孔內液體、拍干、用洗滌液注滿每孔，棄去拍干，反復五次后拍干。
3、顯色劑:先加顯色劑A每孔1滴(0.05ml)，然后再加顯色劑B每孔1滴(0.05ml)，混勻，37℃孵育10分鐘。
4、每孔加終止液1滴(0.05ml)，混勻。
三、結果
比色法:波長450nm，先用空白孔校零點，然后讀取各孔光密度值。
樣品OD值/陰性對照平均OD值≥ 2.1判斷為陽性，否則為陰性。
備注：陰性對照平均OD值低于0.05作0.05計算，高于0.05按實際OD值計算。陽性對照OD值≥0.8，實驗結果有效。
四、注意事項
1、試劑盒置2℃～8℃保存。
2、使用前試劑應搖勻，并棄去1～2滴后垂直滴加。
3、從冷藏環(huán)境中取出試劑盒內全部瓶裝試劑及待測標本所需微孔條，置室溫平衡30分鐘后再行測試，余者應及時封存于冰箱中以備后用。
4、待測標本不可用NaN3防腐。
5、不同批號試劑請勿通用。
6、結果判斷須在10分鐘內完成。
7、若濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶時，請置37℃至溶解。