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公司動(dòng)態(tài)

如何計(jì)算樣本中的蛋白含量

閱讀:1686          發(fā)布時(shí)間:2016-4-7

    做ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),大家都知道樣本要進(jìn)行一定比例的濃度稀釋,且稀釋太低或太高都會(huì)導(dǎo)致線性關(guān)系不理想,結(jié)果也就不準(zhǔn)了。那么,如何從標(biāo)準(zhǔn)曲線中通過樣本的吸光度計(jì)算樣本中的蛋白含量?方法很簡(jiǎn)單,只需三步驟,輕輕松松搞定。

1. 設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)品,以不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)建立坐標(biāo)系,求出曲線方程y=ax+b,
2. 得出回歸方程 x=(y-b)/a 
3. 所得樣品吸光度代入方程即可取得所檢測(cè)的濃度

Elisa檢測(cè)中,包被酶標(biāo)版所用的抗體量,可以用公式計(jì)算:V=5n/a(單位:ul),a:抗體濃度,n:酶標(biāo)板數(shù)量。

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