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公司動(dòng)態(tài)

ELISA試驗(yàn)做復(fù)孔問題介紹

閱讀:3338          發(fā)布時(shí)間:2015-5-25

徐州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院崔老師由同事介紹我公司,老師想做小鼠IL-6等相關(guān)指標(biāo)的ELISA試驗(yàn),老師介紹到樣本量收集的較少(18個(gè)樣本,總共分了6組。不同組的樣本是不同藥物處理的),而試劑盒的zui小規(guī)格就是48T(48T可以檢測37個(gè)樣本,11孔做標(biāo)準(zhǔn)空白對(duì)照孔),我司銷售專員建議老師實(shí)驗(yàn)可以做個(gè)復(fù)孔,這樣的實(shí)驗(yàn)報(bào)告結(jié)果會(huì)更加。

崔老師聽取了我司銷售專員的建議,在設(shè)計(jì)ELISA復(fù)孔檢查時(shí),提出問題:是對(duì)同一個(gè)樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個(gè)孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個(gè)孔?前者似乎把稀釋時(shí)的誤差也考慮到了,但做出來的結(jié)果兩個(gè)孔相關(guān)挺大的。

我司技術(shù)答復(fù):

采用后者。如果在實(shí)驗(yàn)室階段,可能需要多次稀釋,然后將不同稀釋次數(shù)的分別做復(fù)孔,以便檢查稀釋過程中帶來的誤差;如果同一次稀釋的復(fù)孔一致的存在檢測差異大,可能ELISA板的均一性存在一定問題(排除操作因素)。如果不同稀釋次數(shù)差異大,說明稀釋方法有問題。

在ELISA實(shí)驗(yàn)中設(shè)復(fù)孔,目的是為了減少本次實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)帶來的影響,所以應(yīng)該用第二種,有條件的話復(fù)孔的數(shù)量可以增加,系統(tǒng)誤差更小。

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