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制作標準曲線我們需要用什么方程去擬合呢?
閱讀：909 發(fā)布時間：2013-11-22zui近上海恒遠不斷收到用戶反饋的關(guān)于制作試劑標準曲線的問題，確實，制作標準曲線對我們的實驗來說也很重要，標準曲線做的好或壞會直接影響到我們的實驗結(jié)果，甚至是實驗的成敗問題。那么今天就讓上海恒遠ELISA試劑盒來告訴您制作標準曲線我們需要用什么方程去擬合呢？
用于免疫檢測的所謂“標準曲線”其實稱為擬合曲線比較合適。免疫檢測時標準點（可以是倍比稀釋的，也可以不是）濃度如果和相應(yīng)的吸光度（OD）值如 果能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當然是的了，這時可以通過EXELL等方便的獲得擬合曲線，進而推算出樣品的濃度值。但我們做免疫檢測很少有時候能夠有這么理想 的情況，標品濃度和相應(yīng)OD值往往是"S"型的曲線關(guān)系，這時就不能用直線擬合的方式了，而對擬合方法進行選擇就是必要的了。
關(guān)于標準曲線的擬合方式，直線、二次曲線、三次曲線、指數(shù)、對數(shù)等雖都可用于ELISA及其它生物學(xué)反應(yīng)中的曲線擬合，但都只適用于曲線的一部分， 有的適用于前半段，有的適用于后半段，有的適用于中間一段，而Logistic曲線則對曲線的全部都有較好的適用性。當然，如果用于定量，還是在中間一段 較好。這些方法雖然沒有一種方法可以通用，但也都可以用。關(guān)鍵在于你的標準曲線做到了S形的哪一部分，你想檢測的樣品濃度在曲線的哪一部分。在S曲線的低 濃度部分可以用乘冪方程很好的擬合，中低濃度部分可以用直線方程，中間部分可用對數(shù)方程，而中后段可用四參數(shù)。
目前上zui流行的免疫檢測擬合方式是“四參數(shù)邏輯擬合”，用這種擬合方式往往能夠比較的反映濃度和吸光度的曲線關(guān)系，從而進一步比較正確的獲 得樣品中待測物質(zhì)的濃度值。
其實，在一個長的區(qū)間內(nèi)，Logistic應(yīng)該都能擬合得較為理想。但并不是說它就是的。事實上不僅是ELISA，其它很多生物學(xué)反應(yīng)都是S形 曲線，也都可以用Logistic曲線擬合。但建模型是一回事，而用它來定量是另一回事。如果用來定量，S形曲線的中間段（較陡處）是比較好的，而兩端的 平坦部分計算誤差會大，有時甚至?xí)艽蟆?/span>
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