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小鼠基因操作的廣泛運(yùn)用

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據(jù)elisa試劑盒報(bào)道:過(guò)去科學(xué)家利用自然配種方法篩選產(chǎn)生具有特定性狀的純品系小鼠,并且發(fā)現(xiàn)部分基因的突變與缺失對(duì)生物體會(huì)產(chǎn)生顯而易見(jiàn)的影響。例如白子小鼠是由于體內(nèi)酪胺酸酵素發(fā)生突變,無(wú)法出黑色素,小鼠因而呈現(xiàn)純白的毛色以及鮮紅的眼睛。然而,能夠藉由外表型態(tài)變化所找出來(lái)的功能基因畢竟有限,因此,成功地應(yīng)用于小鼠的基因剔除技術(shù)便成為科學(xué)家研究基因功能的有利工具。
基因剔除技術(shù)的目的,在于針對(duì)單一基因進(jìn)行破壞,使失去基因的生物體無(wú)法產(chǎn)生該基因的蛋白質(zhì),藉由實(shí)驗(yàn)與觀察來(lái)預(yù)測(cè)基因可能具備的功能。剔除基因的實(shí)驗(yàn)原理,是把制作好的基因剔除載體以電破法方式,利用電流造成細(xì)胞膜通透性增加,使載體進(jìn)入胚胎干細(xì)胞內(nèi),然后藉由 DNA 同源重組機(jī)制破壞染色體上正常的基因結(jié)構(gòu),而這些胚胎干細(xì)胞要如何長(zhǎng)成一只獨(dú)立小鼠呢?方法就在于將胚胎干細(xì)胞送回正常囊胚期胚胎,并且移入代理孕母的子宮內(nèi)發(fā)育成長(zhǎng)。
小鼠胚胎干細(xì)胞乃是從受精后第 3.5 天的囊胚取得。胚胎干細(xì)胞的特色,在于具有分化成為小鼠各種器官組織的潛力,卻不能分化產(chǎn)生胎盤等胚胎外組織,因此無(wú)法像受精卵般在子宮內(nèi)單獨(dú)發(fā)育成小鼠。因此,要讓體外培養(yǎng)的干細(xì)胞長(zhǎng)成小鼠,必須把干細(xì)胞再一次送入囊胚之中,和寄主囊胚中的胚胎細(xì)胞混合,共同在代孕母鼠子宮內(nèi)發(fā)育生長(zhǎng)。小鼠出生后全身上下的各種組織就會(huì)由兩種胚胎細(xì)胞共同混合組成,就像馬賽克拼圖一般,我們通稱為嵌合鼠。
嵌合鼠配種后的*代可以經(jīng)由 DNA 檢驗(yàn)以確認(rèn)染色體對(duì)偶基因之一是否帶有突變的基因,稱為異型合子。再將兩只同為異型合子的公母鼠互相配種,第二代有四分之一的機(jī)率能夠產(chǎn)生同型合子的小鼠,這時(shí)小鼠體內(nèi)所有細(xì)胞的對(duì)偶基因都帶有突變,無(wú)法表現(xiàn)蛋白質(zhì)。研究人員便能夠觀察小鼠在生長(zhǎng)、發(fā)育、以及行為表現(xiàn)上所產(chǎn)生的異常,找出可能的原因機(jī)制。許多人類先天性的遺傳疾病,與后天發(fā)展的疾病諸如:癌癥、神經(jīng)退化、老化等問(wèn)題,科學(xué)家藉由改變小鼠遺傳基因的實(shí)驗(yàn)也已經(jīng)成功地產(chǎn)生同樣的病征。這些研究不僅證實(shí)了疾病與基因的關(guān)聯(lián)性,對(duì)于尋找有效的治療方法也同樣帶來(lái)了許多貢獻(xiàn)。上海恒遠(yuǎn)本月新品推薦,咨詢訂購(gòu)。

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