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氨基酸分離純化的辦法

2012-2-6 閱讀(6377)

氨基酸分離純化的辦法 

       氨基酸鹽析常用的中式鹽,主要有-硫-酸-銨、-硫-酸-鎂、-硫-酸-鈉、食鹽、磷酸鈉等。因為這個在鹽析前血清要加等量機體機能鹽水稀釋,使氨基酸含量在2.5-3.0。這個之外也可用葡糖凝膠G-25G-50過柱的方法除鹽,所用的時間就比較短。氨基酸液體濃度:氨基酸液體濃度高時,欲離合的氨基酸每常摻雜著其它氨基酸地一塊兒沉淀出來(共沉現象)。鹽析時若溶液pH在氨基酸等電點則效果更好。普通溫度低氨基酸溶介度減低。

       影響鹽析的因素有:溫度:除對溫度敏銳的氨基酸在低溫5度操作外這時需要使用生化培養(yǎng)箱,普通可在室溫中施行。pH值:大部分數氨基酸在等電點時在濃鹽溶液中的溶介度zui低。

       氨基酸在用鹽析沉淀離合后,需將氨基酸中的鹽去掉除掉,常用的方法是透析,即把氨基酸溶液裝入秀析袋內常用的是玻璃紙,施行透析,并不斷的改變,因透析所需時間較長,所以在低溫中施行。因為各種氨基酸分子顆粒體積、親水程度不一樣,故鹽析所需的鹽液體濃度也不同,因為這個調節(jié)混合氨基酸溶液中的中式鹽液體濃度可使各種氨基酸分段沉淀。但有的氨基酸如鮮紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白在較高的溫度20度比0度時溶解度低,培養(yǎng)箱KLYQ 更容易鹽析。

      中式鹽對氨基酸的溶解度有顯著影響,普通在低鹽液體濃度下隨著鹽液體濃度升高,氨基酸的溶解度增加,此稱鹽溶;當鹽液體濃度接著升高時,氨基酸的溶解度不一樣程度減退并先后析出,這種現象稱鹽析,將數量多的鹽加到氨基酸溶液中,高液體濃度的鹽離子如-硫-酸-銨的SO4NH4有很強的水合力,可奪氨基酸分子的水合層使之失水,于是氨基酸膠粒凝固并沉淀析出。那里面應用zui多的-硫-酸-銨,它的長處是溫度系數小而溶解度大20度時達到zui高限度溶液為4.1M,即767/升;0度時達到zui高限度溶解度為3.9M,即676/升),在這一溶解度范圍內,很多氨基酸和酶都可以鹽析出來;額外-硫-酸---銨分段鹽析效果也比其它鹽好,不易引動氨基酸改變性別。-硫-酸-銨溶液的pH常在4.5-5.5之間,當用其它pH值施行鹽析時,需用-硫-酸-或氨水調節(jié)。

 


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