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鑒定轉(zhuǎn)基因植物的方式

2012-2-6 閱讀(1779)

鑒定轉(zhuǎn)基因植物的

*步就是要確認(rèn)被轉(zhuǎn)基因已經(jīng)牢穩(wěn)的整合到達(dá)染色體上。

第二步擔(dān)任的工作就是評(píng)估有若干個(gè)轉(zhuǎn)基因復(fù)印,以及每個(gè)轉(zhuǎn)基因的表現(xiàn)水準(zhǔn)怎么樣。

普通通過上游表現(xiàn)載體的預(yù)設(shè)構(gòu)建以及下游轉(zhuǎn)化整體體系的樹立、轉(zhuǎn)化品系的用篩子選鑒定等一系列步驟后,即取得 T 0 代轉(zhuǎn)基因植物。在轉(zhuǎn)化過程中,外源 DNA 隨機(jī)插進(jìn)去植物內(nèi),插進(jìn)去的復(fù)印數(shù)和位點(diǎn)都不固定。插進(jìn)去外源基因的復(fù)印數(shù)低(12個(gè))能較好的表現(xiàn),插進(jìn)去的復(fù)印數(shù)多則會(huì)造成表現(xiàn)的不定甚至于基因沉默現(xiàn)象。因?yàn)檫@個(gè)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備電熱鼓風(fēng)干燥箱、真空干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱,生化培養(yǎng)箱檢驗(yàn)測定T0代植物的外源基因的復(fù)印數(shù)是研討其分子特別的性質(zhì)的基礎(chǔ)步驟之一。

  通常檢測手段和方法有兩種:

1、熒光定量PCR辦法

2、Southern Blot

3、常用的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備:鼓風(fēng)干燥箱、真空干燥箱、恒溫培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、恒溫?fù)u床等。

4、品牌可以選折;干燥箱KLYQ培養(yǎng)箱KLYQ、恒溫?fù)u床KLYQ等。

 


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