cDNA克隆的构建过程

首先是逆转录酶和cDNA*链的合成。逆转录酶是DNA或者RNA依赖的DNA聚合酶，可以利用DNA或者RNA合成DNA。cDNA的克隆主要是通过寡聚胸腺嘧啶从3’A尾巴开始合成cDNA，但这样得到的cDNA克隆中有10%~15%没有3’端的序列；6到9个核苷酸随机引物也可用于逆转录的反应中，这对于长转录本5’端的扩增很有利，但是这样的方法不能得到全长cDNA；其次是合成cDNA第二链。单链cDNA3’端的发卡结构，便于DNA聚合酶I发挥5’→3’聚合酶活性，合成cDNA的第二链；zui后将双链cDNA克隆到质粒和噬菌体载体中进行扩增，zui后进行测序，研究转录本的信息以及功能。 

复能基因cDNA克隆特点

• 源于高质量的cDNA文库，外源片段插入区为全长转录本

• 保证ORF区序列的准确性

• 所有的基因全为NCBI标准

• 克隆易于在大肠杆菌保存和扩增基因

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cDNA 克隆载体

* 本产品仅供研究、不用于临床诊断