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為什么提取DNA過(guò)程中要用冷凍離心機(jī)

閱讀:6057      發(fā)布時(shí)間:2014-5-12
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DNA的分離和提取中一般要用到離心機(jī)三次:

*次離心是在細(xì)胞破碎后,目的是除去溶液中的固體雜質(zhì)。

第二次離心是在*次離心的上清中加入苯酚/氯仿/異戊醇溶液以后,目的是將DNA和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)分離。

第三次離心是在第二次離心的上清中加入氯仿/異戊醇溶液之后,目的是進(jìn)一步純化DNA、并除去上一步中引入的苯酚。 

    為什么要要冷凍的離心機(jī)呢,雖然冷凍或低溫會(huì)對(duì)細(xì)胞造成DNA損傷,影響結(jié)果。但冷凍條件下能夠很好地把核酸DNA沉淀下來(lái),若采用室溫離心,必需要提高轉(zhuǎn)數(shù)才能在相同時(shí)間內(nèi)獲得相當(dāng)?shù)某恋砹?。溫度不合適情況下的離心分離會(huì)加速DNA降解或者斷裂。

 

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