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RPMI-1640基础培养基配制等详细说明书

时间:2014/10/24阅读:7826
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RPMI-1640基础培养基是zui常用的一种培养基,由 Moore et al 在1967 年为人的白血球细胞开发的,并以他所在的研究所(RoswellPark Memorial Institute)而命名。目前用于多种动物细胞的生长。

高压灭菌型是该培养基的热稳定配方,可保证其营养成份在高压高热中不受影响。该配方中不含 L-谷氨酰胺及碳酸氢钠,需在高温灭菌后添加。

产品型号

RPMI1640 基础培养基,含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氢钠

RPMI1640 基础培养基,含 L-谷氨酰胺,不含酚红,不含碳酸氢钠

RPMI1640 基础培养基,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氢钠

RPMI1640 基础培养基,含 L-谷氨酰胺,含 HEPES,不含碳酸氢钠

RPMI1640 基础培养基,高压灭菌型,不含 L-谷氨酰胺,不含碳酸氢钠

产品规格

干粉(1L, 10L 及 100L); 液体(500 ml)

配制方法

干粉培养基的过滤配制

1 将 1 升量的干粉在 950ml 细胞培养级纯净水中*溶解

2 加入 2 克碳酸氢钠,继续搅拌至*溶解

3 用 1N 盐酸或 1N 氢氧化钠调整到要求的 pH,并将溶液体积调至1000ml

4 在超净台内用 0.22um 滤膜负压过滤

5 将培养基在 2~8℃避光保存

高压灭菌型的配制

1 将 1 升的高压灭菌型干粉在 900ml 细胞培养级纯净水中*溶解

2 将溶液 pH 调至 4.0 并将溶液体积调至 960ml

3 在 121℃,15psi 高压消毒 5 分钟

4 将培养基迅速取出,避免过久加热引起成份分解或液体蒸发减少

5 待培养基冷却至室温后,无菌操作加入 29.3ml 的无菌 7.5%碳酸

氢钠溶液,及 10ml 的无菌 200mM L-谷氨酰胺

6 如有必要,用无菌的 1N 盐酸或 1N 氢氧化钠调整 pH

7 将培养基在 2~8℃避光保存

自备材料  

细胞培养级或注射级纯水  

7.5%碳酸氢钠溶液(无菌)  

200mM 谷氨酰胺溶液(无菌)  

1 N 盐酸溶液(无菌)  

1 N 氢氧化钠溶液(无菌)

质检指标  

形状:淡黄色均匀粉末(干粉),澄清透明(液体)  

溶解:干粉按要求溶解后澄清透明  

pH 值:(加碳酸氢钠前)4.4-5.0(加碳酸氢钠后)(液体)7.4-8.0  

渗透压:(加碳酸氢钠前)230-270(加碳酸氢钠后)280-320 (液  体)  

菌落:每克小于 100cfu (干粉),无菌(液体)  

细胞生长:正常(干粉及液体)

储存及注意事项

1 所有的液体及干粉培养基应在 2~8℃避光保存,并在有效期内使用。

2 щ 倇或沉淀。

3 液体培养基的 pH 储存时会因为二氧化碳的逃逸而发生改变。建议尽量减少开瓶次数。

4 灭菌后的液体培养基添加物应无菌并在无菌操作下添加。

5 干粉培养基吸湿性强,极易吸水变质。粉包打开后应全部使用或剩余舍弃。

注意:

本产品于研发生产使用。

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