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不同化学转染方法的优点与缺点是什么?

时间:2024/5/13阅读:568
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化学法转染技术已广泛应用于细胞的稳定或瞬时转染,那么你知道不同化学转染方法的优点与缺点是什么吗?让我们一起来看看吧!

一、阳离子脂质体

优点:

1.操作快速简单。

2.结果可重复。

3.转染效率高。

4.可转染DNA,RNA和蛋白质。

5.适用于生产瞬时和稳定的蛋白质。

6.可用于体内转染。

缺点:

1.需进行条件优化(一些细胞系对阳离子脂质体较敏感)

2.有些细胞系不容易转染。

3.血清的存在干扰复合物的形成,导致低转染效率。

4.培养基中血清的缺失会增加细胞毒性。

二、磷酸钙共沉淀

优点:

1.便宜且容易获得。

2.适用于生产瞬时和稳定的蛋白质。

3.转染效率高(不限制细胞系)。

缺点:

1.需要仔细制备试剂  CaPO4溶液对pH,温度和缓冲盐浓度的变化敏感。2.可重复性较差。

3.有细胞毒性,尤其对原代细胞。

4.不能采用RPMI培养基,由于其含高浓度的磷酸盐。

5.不适用于动物体内转染。

三、葡聚糖:

优点:

1.操作简单。

2.结果可重复。

3.便宜。

缺点:

1.对某些细胞有化学毒性。

2.只限于瞬时转染。

3.转染效率低,尤其在原代细胞中。

四、其他阳离子聚合物

优点:

1.在血清中稳定,对温度不敏感。

2.高转染效率(限制细胞系)。

3.结果可重复。

缺点:

1.对某些细胞有毒性。

2.不能生物降解(树枝状大分子)。

3.只限于瞬时转染。


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