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超氧阴离子试剂盒提取方法

时间:2024/5/7阅读:515
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测定意义:



生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

测定原理:

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2,NO2在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2含量。

自备实验用品及仪器:

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、lv仿和蒸馏水。

试剂组成和配制:

提取液:液体100mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体8mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂三:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。

试剂四:lv仿,自备。

超氧阴离子提取

1. 植物、动物组织:称取约0.1g样本,加入提取液1mL,充分研磨,12000rpm,4℃,离心20min,取20μL上清测定蛋白含量,其余上清作为待测样本。

2. 血清或培养液:直接测定。


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