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層析柜的工作原理分析

閱讀:1720      發(fā)布時(shí)間:2022-5-10
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 生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠?qū)R欢赡娴慕Y(jié)合,這種結(jié)合力就稱(chēng)為親和力。親和層析就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對(duì)另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。

被固定在基質(zhì)上的分子稱(chēng)為配體,配體和基質(zhì)是共價(jià)結(jié)合的,構(gòu)成親和層析的固定相,稱(chēng)為親和吸附劑。親和層析時(shí)首先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體,并將配體共價(jià)結(jié)合在適當(dāng)?shù)牟蝗苄曰|(zhì)上。

將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當(dāng)樣品溶液通過(guò)親和層析柱的時(shí)候,待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結(jié)合,從而留在固定相上;而其它雜質(zhì)不能與配體結(jié)合,仍在流動(dòng)相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過(guò)適當(dāng)?shù)南疵撘簩⑵鋸呐潴w上洗脫下來(lái),就得到了純化的待分離物質(zhì)。

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