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上海凱朗儀器設備廠
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厭氧培養(yǎng)箱學習指南
2015-5-4 閱讀(388)
一、 厭氧培養(yǎng)箱概述
厭氧培養(yǎng)箱是一種在無氧環(huán)境條件下進行細菌培養(yǎng)及操作的裝置。它能提供嚴格的厭氧狀態(tài)恒定的溫度培養(yǎng)條件和具有一個系統(tǒng)化、科學化的工作區(qū)域。在本裝置內操作培養(yǎng)，可以培養(yǎng)zui難生長的厭氧生物，又能避免以往厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。因此本裝置是厭氧生物檢測科研的理想工具。本裝置也是一物多用的良好儀器，如改變操作方式，為微需氧菌的生長繁殖提供良好的生長條件。
二、 厭氧培養(yǎng)箱特點
厭氧培養(yǎng)箱是由真空取樣室、恒溫厭氧操作室、氣路、電路控制系統(tǒng)等部分組成。整機造型新穎、結構緊湊，具有厭氧環(huán)境好、密風性能好、溫控精度高，穩(wěn)定性好、使用方便、省氣、經濟、工作安全可靠等優(yōu)點。其特點如下：
1. 使用科學*手段達到厭氧環(huán)境的高精度，其恒定性能好、使用可靠；
2. 培養(yǎng)箱溫度采用微電腦控制，能準確直觀地反映箱內溫度，能自動進行溫度再控制，是一套有效的限溫保護裝置，確保培養(yǎng)物在安全溫度環(huán)境條件下生長；
3. 箱內裝有紫外線殺菌燈，可有效地避免雜菌污染；
4. 氣路裝置，可任意準確調節(jié)流量，能任意輸入各種所需氣體；
5. 氣路由微電腦控制，電磁閥啟動或閉合、操作靈活；
6. 操作室前窗采用厚透明特種玻璃制作，能清晰直接觀察室內操作情況，操作使用塑膠手套可靠舒適、靈活、使用方便；
7. 室內裝有除氧催化器。
三、 厭氧培養(yǎng)箱主要技術指標
1. 取樣室形成厭氧狀態(tài)時間小于5分鐘；
2. 操作室形成厭氧時間小于1小時（抽氣充氣置換）；
3. 操作室在停止補充微量混合氣體的情況下，厭氧環(huán)境維持時間大于10小時；
4. 使用溫度：室溫+3℃~50℃；
5. 培養(yǎng)室溫度波動≤±0.3℃；溫度分布均勻性≤±1.0℃；
6. 操作室內體積：820mm×550mm×660mm（長×高×寬），
7. 培養(yǎng)箱尺寸：250mm×190mm×290mm
8. 電源220V±10%AC，功率：500VA
四、厭氧培養(yǎng)箱安裝
1. 整機應安放在溫差較小、操作方便的位置，應避免陽光直曬和遠離采暖設備，放置平穩(wěn)；
2. 將混合氣瓶、氮氣瓶安放平穩(wěn)，并分別裝好減壓閥（含壓力表），安置在適當位置；
3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合；
五、厭氧培養(yǎng)箱 使用
（一）操作室厭氧環(huán)境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具；
2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調節(jié)所需溫度；
3. 操作室內放入1000g鈀粒（封閉）和500g干燥劑，并放入美蘭指示紙（封閉）；
4. 關緊取樣室內外門，并抽真空校驗；
5. 操作室內*次置換（氮氣置換）：
A. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊
B. 接通氮氣進氣路，打開氮氣控制閥1，使手套鼓起，關閉閥門1，然后扎緊袋口；
6. 操作室第二次置換（氮氣置換）重復一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關開閉排氣。如此連續(xù)三次氮氣置換。
7. 操作室第四次置換（混合氣體置換）：
（混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%）
A. 調換氣路打開混合氣閥3進氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關開閉排氣；
B. 關掉混合氣體閥3，并打開閥5，使混合氣體經過流量計，調整流量計，流量為每分鐘10ml左右；
C. 混合氣體重復2-3次轉換，經過上述過程，基本形成厭氧環(huán)境。
8. 操作室內打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進行催化除氧，一小時后打開美蘭指示紙觀察其變色情況，不變色為操作室內達到厭氧環(huán)境；
9. 開紫外線滅菌燈，室內進行滅菌處理，滅菌時間按具體實驗自定。
（二）菌種的置入和培養(yǎng)：
1. 檢查取樣室內門并關緊；
2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關上外門；
3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后人工打開氮氣閥2進氣，使指針回復零位，關掉閥2。第二次重復操作一次。第三次操作時，使真空度500ml汞柱（66kPa）以上停，然后打開閥4進混合氣，使指針回復零位，關掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結束；
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù)；
5. 取樣室外門開啟、關緊，再抽低真空度100ml汞柱（13kPa）檢驗；
6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件：
A. 每天在操作室內打開美蘭指示紙觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣；
B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補進的氮氣能和微量的氧結合通過催化吸收，保證室內厭氧狀態(tài)，補入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右；
C. 連續(xù)培養(yǎng)運行一天，更換一次除氧劑和干燥劑。
D. 操作室內溫度可任意選擇和控制。
7. 混合氣瓶、氮氣瓶輸出壓力調整：調節(jié)減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。
六、 厭氧培養(yǎng)箱注意事項
1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方；
2. 開機前應全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法；
3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內達到厭氧環(huán)境后放入；
4. 如發(fā)生故障（停氣等原因）操作室內仍可保持10小時厭氧狀態(tài)（超過10小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理）；
5. 經常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象；
6. 調換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體；
真空泵按要求使用，定期檢查加油。
