保存时间漂移的几种zui常见的原因
保存时间不重现有两种不同的情况：即保存时间漂移和保存时间波动。前者是指保存时间仅沿单方向发生变化，而后者指保存时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到题目的原因往往很有帮助。如，保存时间的漂移往往由柱老化引起；而柱老化不可能引起保存时间的无规律波动。事实上，保存时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或活动相所致）等。保存时间漂移的几种zui常见的原因如下：  

    一色谱柱平衡 

            假如我们观察到保存时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用活动相*平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的活动相，但假如在活动相中加进少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。 酸碱度计| 电导计| 水分测定仪| 浊度计| 色度计| 粘度计| 折射计| 滴定仪| 密度计| 热流计| 浓度计| 折射仪| 采样仪| 

            活动相污染也可能是原因之一。溶于活动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保存时间的漂移。应留意：水是很轻易污染的活动相成分。 

    二固定相稳定性 

           固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。例如，硅胶基质在pH4时水解稳定性。水解速度与活动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。 

           经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。 

    三色谱柱污染 

            保存时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附活动相携带的任何物质。污染源可以是：活动相本身，活动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判定污染的来源。 

            样品中假如存在色谱柱上保存很强的组分，就可能是使保存时间漂移的潜伏根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保存组分具有较高的分子量，在此情况下，保存时间漂移的同时或其后会有反压的增加?？梢酝ü褂霉滔嗵崛。⊿PE）等样品前处理方法来往除样品基质的影响。 

            避免色谱柱污染zui简单的方法是防患于未然。相比之下，找到题目的所在并设计有效的清洗步骤以往除污染物要困难的多。广州市骏凯电子科技有限公司通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在活动相中溶解。如THF可往除反相色谱柱中的很多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO经常用于往除反相色谱柱中的蛋白。 
使用?；ぶ歉龇浅Ｓ行У姆椒ā７闯迳字鍪遣坏靡咽辈捎玫陌旆?。  

    四活动相组成 

            活动相组成的缓慢变化也是保存时间漂移的常见原因。如活动相中易挥发组分的挥发及循环使用活动相等。 

    五疏水坍塌 

             当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为活动相时，有时会发生分离忽然丧失及被分析物质保存明显降低或*不保存的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由活动相不浸润固定相表面而致。拯救的办法实现用含大量有机组分的活动相浸润固定相，再用高水含量的活动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱（如Waters SymmetryShield RP色谱柱）或非端基封口的色谱柱（如Waters Resolve色谱柱）也可避免发生坍塌。