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小鼠(Mouse)肿瘤坏死因子βELISA试剂盒详细资料

阅读:926          发布时间:2013-11-15
提 供 商 上海恒远生物科技有限公司 资料大小 64.5KB
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小鼠(Mouse)肿瘤坏死因子βELISA试剂盒操作步骤:

  1.    使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
  2.    根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
  3.    加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育45分钟。
  4.    甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  5.    每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
  6.    甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
  7.    每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光照。
  8.    取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
  9.    在450nm波长处测定各孔的OD值。

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