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ELISA實驗加樣步驟不當可能會影響實驗結果及解決方法

閱讀:2035          發(fā)布時間:2014-8-18

ELISA實驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床跟科研得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)操作不當可能會對實驗的檢測結果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果?,F(xiàn)我公司技術人員將加樣操作中常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以便給同行帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量:

加樣 可能原因:

1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;

2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時);

3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。

解決辦法:

1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。

2) 加樣后及時放入孵箱。

3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。

5) 標本較多時,請分批操作。

 

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