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技術(shù)文章

人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒檢測原理

閱讀:1358          發(fā)布時(shí)間:2013-7-22

人傷寒抗原(St-Ag)ELISA試劑盒檢測原理:

ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
ELISA則應(yīng)用更為廣泛,可用以檢測的項(xiàng)目包括以下幾個(gè)方面:
  1.病原體及其抗體廣泛應(yīng)用于傳染病的診斷。病毒肝炎病毒、風(fēng)疹病毒、皰疹病毒、輪狀病毒等;細(xì)菌如鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、幽門螺桿菌和布氏桿菌等;寄生蟲如弓形體、阿米巴、瘧原蟲等。
  2.蛋白質(zhì)各種免疫球蛋白、補(bǔ)體組分、腫瘤標(biāo)志物(例如甲胎蛋白、癌胚抗原、前列腺特異性抗原等)、各種血漿蛋白質(zhì)、同工酶(如肌酸激酸MB)、激素(如HGG、FSH、TSH)。
  3.非肽類激素如T3、T4、雌激素、皮質(zhì)醇等。

 

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
1)標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)溶:試劑盒提供6管標(biāo)準(zhǔn)品,每管已標(biāo)定濃度,并且凍干。實(shí)驗(yàn)前在每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管中加入0.5mL樣本稀釋液,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)助其溶解,使其恢復(fù)為每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品管身標(biāo)注的濃度。
2)20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度。

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