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技術(shù)文章
細(xì)胞破碎的技術(shù)方法
閱讀：1909 發(fā)布時(shí)間：2013-3-29細(xì)胞破碎技術(shù)是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁，使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù)，是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)（產(chǎn)品）的基礎(chǔ)。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進(jìn)展，以前認(rèn)為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn)。
由于細(xì)菌、酵母、真菌、植物都有細(xì)胞壁，但成分不同，且同類(lèi)細(xì)胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)不同，因此其細(xì)胞壁的堅(jiān)固程度不同，總體呈現(xiàn)遞增態(tài)勢(shì)。動(dòng)物細(xì)胞雖沒(méi)有細(xì)胞壁，但具有細(xì)胞膜，也需要一定的細(xì)胞破碎方法來(lái)破膜，達(dá)到提取產(chǎn)物的目的。
化學(xué)試劑法
• 方法：某些有機(jī)溶劑（如苯、甲苯）、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)含物有選擇地滲透出來(lái)。SDS（十二烷基磺酸鈉）是典型的陰離子表面活性劑
• 特點(diǎn)：提取核酸時(shí)，常用此法破碎細(xì)胞。
• 存在的問(wèn)題：
a） 時(shí)間長(zhǎng)，效率低;
b） 化學(xué)試劑毒性較強(qiáng)，同時(shí)對(duì)產(chǎn)物也有毒害作用