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豬免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
豬免疫球蛋白A(IgA)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中免疫球蛋白A(IgA)量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬免疫球蛋白A(IgA)水平。用純化的豬免疫球蛋白A(IgA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入豬免疫球蛋白A(IgA),再與HRP標(biāo)記的免疫球蛋白A(IgA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸 -
人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)
人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)酶聯(lián)免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)的含量。實驗原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)水平。用純化的人成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP),再與HRP標(biāo)記的成纖維細(xì)胞活化蛋白(FAP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TM -
隨著熒光檢測的普及,許多研究人員正考慮將westernblot的檢測方法從化學(xué)發(fā)光轉(zhuǎn)到多重?zé)晒?。這一趨勢背后有多個推動力。zui重要的是,熒光檢測能夠?qū)崿F(xiàn)多重westernblot分析,每次能夠同時檢測幾個目標(biāo)蛋白,而不再需要剝離和重新雜交。熒光的其他好處在于動態(tài)范圍更寬、信號穩(wěn)定性更好。熒光blotting的小貼士?抗體濃度應(yīng)當(dāng)優(yōu)化,在幾種不同稀釋度的抗體中孵育膜。選擇信噪比zui高的稀釋度。?從化學(xué)發(fā)光轉(zhuǎn)到熒光檢測時,一抗?jié)舛葢?yīng)當(dāng)增加;通常來說是增加2-5倍。二抗?jié)舛瓤赡芤残枰獌?yōu)化;1:5,
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實驗原理血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態(tài)氧,使鄰甲聯(lián)苯胺氧化發(fā)生顏色變化,由無色zui終變?yōu)樗{(lán)紫色。根據(jù)顯色深淺與標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較,可測出其含量。實驗方法材料:1.2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液2.1%H2O23.10%醋酸溶液4.分光光度計方法:1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。2.按下表進(jìn)行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調(diào)零,測定測定管的吸光度。試劑(ml)測定管空白管2g/L鄰甲聯(lián)苯胺溶液0.50.5患者血漿0.02/1%H2O20.50.5混
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ELISA實驗的原理似乎很簡單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個實驗。在實驗結(jié)束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會影響您對結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面有一些tips。洗滌很重要洗滌步驟看似很無聊,其實很重要,因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合
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ELISA試劑盒在實驗室已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測未知樣本中抗原的濃度。用試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實驗更便利,往往還更加?,F(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國產(chǎn)也有進(jìn)口,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出zui適用的產(chǎn)品呢?首先當(dāng)然得根據(jù)我們所要檢測的分子進(jìn)行檢測,除此以外也還有一些需要加以考量的因素,本文就來為您介紹一二。1.實驗類型ELISA試劑盒有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔
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蛋白激酶將磷酸基團(tuán)從ATP轉(zhuǎn)移到蛋白多肽底物上的絲氨酸、蘇氨酸或酪氨酸殘基,直接影響目標(biāo)的活性和功能。放射性研究表明,真核細(xì)胞中大約30%的蛋白經(jīng)過磷酸化修飾。這一關(guān)鍵的翻譯后修飾調(diào)控了廣泛的細(xì)胞活性,包括細(xì)胞周期、分化、代謝和神經(jīng)元通訊。此外,異常的磷酸化事件與許多疾病狀態(tài)相關(guān)。在評估磷酸化時,選擇的方法可能會有所不同,這取決于多個因素,包括提出的具體問題以及特殊儀器或試劑的可用性。如何檢測蛋白磷酸化,本文簡要介紹了幾種常用方法,并提出了每種方法的優(yōu)點和缺點。激酶活性分析蛋白激酶通常是多個信號
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Sigma去糖基化試劑盒Sigma-Aldrich的天然蛋白去糖基化試劑盒(NativeProteinDeglycosylationKit,貨號NDEGLY)可在天然條件下去除糖蛋白上的N連接寡糖。糖基化蛋白修飾通常位于折疊蛋白中不容易接近的位置,因此在未變性的情況下,不大可能通過標(biāo)準(zhǔn)的肽N-糖苷酶F(PNGaseF)處理來去除。如果您的下游分析需要折疊蛋白(如酶學(xué)分析或蛋白相互作用分析),那么這個試劑盒也許適合您。此試劑盒包含了內(nèi)糖苷酶F1、F2和F3,以及相應(yīng)的反應(yīng)緩沖液。與PNGaseF相