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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑盒（MTT法）
| 產(chǎn)品編號(hào) | 包裝 | 價(jià)格 |
| 130005-M | 300T | 185.00 |
| 130005-M1 | 500T | 328.00 |
| 130005-M2 | 1000T | 572.00 |
噻唑蘭（Methylthiazoletetrazolium, MTT）是一種可接受氫離子的淡黃色唑氮鹽染料，被活細(xì)胞線粒體呼吸鏈中的琥珀酸脫氫酶和細(xì)胞色素C還原，使tetrazolium環(huán)開裂，生成水不溶的深紫色結(jié)晶產(chǎn)物甲簪（formazan）。死細(xì)胞因喪失琥珀酸脫氫酶活性，因此甲簪的生成量?jī)H與活細(xì)胞數(shù)目成正比。在特定溶劑存在的情況下，甲簪可以被*溶解，借助酶標(biāo)儀測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度，可推算出活細(xì)胞的數(shù)量或細(xì)胞存活率。細(xì)胞增殖速度越快，則甲簪生成的量越多，吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則甲簪生成的量越少，吸光度越低。由于操作簡(jiǎn)便，成本低，不污染環(huán)境，克服了傳統(tǒng)的同位素?fù)饺牖蜥尫艑?shí)驗(yàn)等操作復(fù)雜，成本高，對(duì)儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室條件要求高，難于防護(hù)等因素，而被廣泛地用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。
賽馳生物開發(fā)生產(chǎn)的細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑盒（Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit） 以MTT為指示劑，在經(jīng)典操作方法的基礎(chǔ)上，采用了*的甲簪溶解液，可以直接溶解甲簪，而無需離心去除原有的培養(yǎng)液，故可避免因甲簪部分被吸除而引起的操作誤差，具有本底低，靈敏度高，線性范圍寬，操作簡(jiǎn)便等特點(diǎn)。
包裝清單
| 細(xì)胞增殖與細(xì)胞毒檢測(cè)試劑盒 | 130005-M | 130005-M1 | 130005-M2 |
| MTT染色液 | 6ml | 10ml | 10ml×2 |
| Formazan溶解液 | 30ml | 50ml | 100ml |
| 說明書 | 1 份 | ||
保存條件
MTT溶液-20℃保存，一年有效；Formazan溶解液室溫或-20℃保存。
使用說明
1. 細(xì)胞的增殖和細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)，一般可在96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行。
2. 每孔加入100微升細(xì)胞懸液。細(xì)胞的數(shù)量取決于實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮团囵B(yǎng)時(shí)間。增殖實(shí)驗(yàn)每孔通常加入103個(gè)以上數(shù)量的細(xì)胞；細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔至少加入5x103個(gè)或以上數(shù)量的細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等因素確定）。
3. 接種的細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)需要，送入細(xì)胞培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。增殖實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升特定的藥物或生長(zhǎng)因子進(jìn)行刺激。細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)通常要給予0-10微升抑制因子或細(xì)胞毒藥物；
4．培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入20微升MTT溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育3－6小時(shí)；
5．孵育結(jié)束后，每孔加入100微升Formanzan溶解液，在37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育，直至在鏡下觀察formazan全部溶解。通常37℃孵育4小時(shí)左右，紫色結(jié)晶會(huì)全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時(shí)間會(huì)短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時(shí)間會(huì)略長(zhǎng)。
6. 在570nm測(cè)定吸光度。如無570nm濾光片， 560-600nm范圍的濾光片均可使用。
