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兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)過(guò)程中值得關(guān)注的問(wèn)題
濃縮:由于凈化過(guò)程中引入的溶劑,可能會(huì)降低待測(cè)組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈?,再用?fù)溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
注意:1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。2在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。3樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),影響zui終檢測(cè)結(jié)果。4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。5 凈化:經(jīng)過(guò)提取的待測(cè)組分中通常含有一些會(huì)干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測(cè)物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測(cè)組分與雜質(zhì)分離的過(guò)程,我們稱為兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒價(jià)格中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見(jiàn)的凈化是:液液分配法。
比如:用復(fù)溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷,在加入正己烷和復(fù)溶液渦動(dòng)后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,可以60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或減弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。
實(shí)例:
A、氟喹諾酮類藥物試劑盒現(xiàn)有的水產(chǎn)樣本前處理方法中,用二氯甲烷作為提取劑。
注意:
 (a)二氯甲烷的密度比水大,離心完后,二氯甲烷在下層,須先用加樣器吸盡上層廢液后,再按要求取適量的下層吹干。
 (b)在用加樣器吸取下層的有機(jī)相時(shí),正常操作往往取量不準(zhǔn)確,此時(shí)用帶有刻度,且刻度較準(zhǔn)確的玻璃管來(lái)定量。
 (c)上訴情況對(duì)有經(jīng)驗(yàn)的試驗(yàn)員還可以通過(guò)靈活控制加樣器來(lái)控制取樣的準(zhǔn)確性。
 (d)在振蕩過(guò)程中要注意安全。二氯甲烷在振蕩的過(guò)程中,如果離心管密封性不是很好,往往容易爆開(kāi);在進(jìn)行振蕩時(shí),不要讓離心管口對(duì)準(zhǔn)自己或者其他人,避免濺到自己或者他人身上。
 (e)兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒在使用前充分回溫很必要,如回溫不充分該項(xiàng)目曲線受影響較明顯。
B、硝基呋喃代謝物檢測(cè)過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題
 硝基呋喃代謝物有四種:3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)和1-氨基-2-內(nèi)酰脲(AHD)在檢測(cè)過(guò)程中也需要同其它項(xiàng)目一樣進(jìn)行添加回收測(cè)評(píng),其中需要注意以下幾個(gè)問(wèn)題。
  代謝物在組織中是與蛋白呈結(jié)合狀態(tài),采用普通的有機(jī)溶劑或緩沖液,是無(wú)法提取該代謝物的。需要用鹽酸水解后才能使呋喃類代謝物游離,所以在加入去離子水、鹽酸和2-硝基苯甲醛(2-NBA)混合均勻后,其pH應(yīng)在1-3之間,否則不利用水解代謝物。
在衍生化過(guò)程中,溫度和時(shí)間決定其衍生化產(chǎn)率,衍生化后在加入氫氧化鈉和磷酸氫二鉀時(shí),其pH應(yīng)在中性左右。由于部分樣本的緩沖能力不同,所以需對(duì)其pH進(jìn)行測(cè)定,因?yàn)樵谒嵝曰驂A性環(huán)境中,不利于呋喃類代謝物的提取回收,同時(shí)也容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒價(jià)格結(jié)果判斷定性測(cè)定 
  定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無(wú)"的簡(jiǎn)單回答,分別用"陽(yáng)性"、"陰性"表示。"陽(yáng)性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無(wú)反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來(lái)表示反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn),呈陽(yáng)性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱,兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測(cè)試劑盒這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性更具定量意義。

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