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兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒實驗原理

最近更新時間:2017-9-14

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兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒檢測過程中值得關(guān)注的問題
濃縮:由于凈化過程中引入的溶劑,可能會降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮氣下吹干,再用復(fù)溶液溶解干燥殘留物。
濃縮方式:氮氣吹干除雜、壓縮空氣吹干除雜。
注意:1在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。2在吹樣本時,針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。3樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時間過長,影響zui終檢測結(jié)果。4不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。5 凈化:經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程,我們稱為兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒價格中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的zui常見的凈化是:液液分配法。
比如:用復(fù)溶液溶解干燥殘留物之前先加入適量的正己烷,在加入正己烷和復(fù)溶液渦動后如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,可以60℃水浴加熱,至乳化現(xiàn)象消失或減弱后,加大離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行離心。
實例:
A、氟喹諾酮類藥物試劑盒現(xiàn)有的水產(chǎn)樣本前處理方法中,用二氯甲烷作為提取劑。
注意:
 (a)二氯甲烷的密度比水大,離心完后,二氯甲烷在下層,須先用加樣器吸盡上層廢液后,再按要求取適量的下層吹干。
 (b)在用加樣器吸取下層的有機相時,正常操作往往取量不準(zhǔn)確,此時用帶有刻度,且刻度較準(zhǔn)確的玻璃管來定量。
 (c)上訴情況對有經(jīng)驗的試驗員還可以通過靈活控制加樣器來控制取樣的準(zhǔn)確性。
 (d)在振蕩過程中要注意安全。二氯甲烷在振蕩的過程中,如果離心管密封性不是很好,往往容易爆開;在進(jìn)行振蕩時,不要讓離心管口對準(zhǔn)自己或者其他人,避免濺到自己或者他人身上。
 (e)兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒在使用前充分回溫很必要,如回溫不充分該項目曲線受影響較明顯。
B、硝基呋喃代謝物檢測過程中常見問題
 硝基呋喃代謝物有四種:3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基嗎啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)和1-氨基-2-內(nèi)酰脲(AHD)在檢測過程中也需要同其它項目一樣進(jìn)行添加回收測評,其中需要注意以下幾個問題。
  代謝物在組織中是與蛋白呈結(jié)合狀態(tài),采用普通的有機溶劑或緩沖液,是無法提取該代謝物的。需要用鹽酸水解后才能使呋喃類代謝物游離,所以在加入去離子水、鹽酸和2-硝基苯甲醛(2-NBA)混合均勻后,其pH應(yīng)在1-3之間,否則不利用水解代謝物。
在衍生化過程中,溫度和時間決定其衍生化產(chǎn)率,衍生化后在加入氫氧化鈉和磷酸氫二鉀時,其pH應(yīng)在中性左右。由于部分樣本的緩沖能力不同,所以需對其pH進(jìn)行測定,因為在酸性或堿性環(huán)境中,不利于呋喃類代謝物的提取回收,同時也容易出現(xiàn)假陽性。
兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒價格結(jié)果判斷定性測定 
  定性測定的結(jié)果判斷是對受檢標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡單回答,分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果,即用滴度來表示反應(yīng)的強度,其實質(zhì)仍是一個定性試驗。在這種半定量測定中,將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗,呈陽性反應(yīng)的zui高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低,可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強弱,兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強陽性、弱陽性更具定量意義。

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