目录:北京索莱宝科技有限公司>>生化检测试剂盒-常量法>>离子系列>> BC4355-100T/96S组织铁含量检测试剂盒 离子
| CAS | 详询 | 纯度 | 详询 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 详询 | 分子式 | 详询 |
| 供货周期 | 现货 | 规格 | 100T/96S |
| 货号 | BC4355 | 应用领域 | 环保,化工,生物产业,农林牧渔,综合 |
| 主要用途 | 组织铁含量检测 |
组织铁含量检测试剂盒说明书
微量法
货号：BC4355
规格：100T/96S
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体110 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2瓶 | 2-8℃保存 |
标准液 | 液体3 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前配制，取1瓶加入5 mL蒸馏水充分溶解，试剂一变黑后则不能使用，2-8℃保存一周；
2、 试剂二：临用前配制，取1瓶加入235 μL冰醋 酸，加入7.5 mL蒸馏水充分溶解；溶解后2-8℃保存一周；
3、 标准液：1 μmol/mL Fe3+标准液。
4、 标准溶液的稀释：临用前取100μL 1 μmol/mL Fe3+标准液，加入700μL蒸馏水，充分混匀，配制成0.125 μmol/mL的标准溶液进行实验，现用现配。（实验中每管需要120μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
产品说明：
铁是人体必须的微量元素之一，它是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分，帮助氧的运输，促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢纷乱，并影响机体的免疫功能。
技术指标：
低检出限：0.00206 μmol/mL
线性范围：0.0039-0.25 μmol/mL
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、氯仿、冰乙酸、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
称取约0.1g组织，加入1mL提取液进行冰浴匀浆。4000g 4℃离心10分钟，取上清。
二、测定步骤
1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min，波长调至520nm。蒸馏水调零。
2. 加样表：
空白管 | 测定管 | 标准管 | |
蒸馏水 | 120 | - | - |
0.125μmol/mL标准液 | - | - | 120 |
样本 | - | 120 | - |
试剂一 | 60 | 60 | 60 |
试剂二 | 120 | 120 | 120 |
混匀后盖紧，置于沸水浴5min，自来水冷却 | |||
氯仿（自备） | 60 | 60 | 60 |
充分震荡混匀后室温10000rpm，离心10min，小心吸取上层无机相200μL，加入微量玻璃比色皿或者96孔板中，于520nm立即测定吸光度，分别记为A空白管、A测定管、A标准管，计算ΔA标准=A标准管-A空白管，ΔA测定=A测定管-A空白管。空白管和标准管只需做1-2次。 | |||
三、组织铁含量计算
1．按组织质量计算：
组织铁含量（μg/g 质量）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷W= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷W
2．按组织蛋白浓度计算
组织铁含量（μg/mg prot）=（C标准液×ΔA测定÷ΔA标准）×V提取×55.845÷（Cpr×V提?。?/span>
= 6.98×ΔA测定÷ΔA标准÷Cpr
C标准液：0.125μmol/mL Fe3+标准液；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本质量，g；V提取：提取液体积，1mL；55.845：Fe的相对分子质量，55.845μg/μmol。
注意事项：
1、 当ΔA大于0.6 时，建议将样本用提取液稀释后进行测定；ΔA过小时，可增加加入的样本体积来测定。
2、 试剂一溶解变黑后则不能使用；试剂二有毒性，做好防护措施。
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