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細(xì)胞增殖ELISA的BrdU（比色法）屬于改進(jìn)的第二代的試劑盒用于測(cè)定DNA的合成。它被設(shè)計(jì)為一個(gè)，快速和簡(jiǎn)單的比色替代定量基于在復(fù)制（單車）細(xì)胞在DNA合成過程中的BrdU摻入測(cè)定細(xì)胞增殖。因此，細(xì)胞的增殖ELISA可用于在體外細(xì)胞系統(tǒng)在許多不同的。例如：

• 生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖的檢測(cè)和定量的
• 環(huán)境和生物醫(yī)學(xué)研究中的各種化合物對(duì)細(xì)胞增殖的抑制或刺激作用的測(cè)定，并在食品，化妝品和制藥行業(yè)
• 測(cè)量的有絲分裂原或抗原刺激淋巴細(xì)胞的免疫反應(yīng)，
• 不同的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的化療敏感性，在醫(yī)學(xué)研究中的分析

• 安全：使用放射性同位素
• 準(zhǔn)確：得到的結(jié)果的強(qiáng)烈相關(guān)的增殖細(xì)胞的數(shù)目（低的平均偏差）
• 敏感：化學(xué)發(fā)光技術(shù)，提供至少相當(dāng)于[ ³ ?]胸腺嘧啶摻入法測(cè)定的靈敏度
• 快速：只在一個(gè)單一的步驟中，一個(gè)洗滌和兩個(gè)保溫步驟的固定和變性，使用的多井的ELISA讀數(shù)器允許更大范圍內(nèi)的被處理的樣本數(shù)
• 方便：試劑提供一個(gè)穩(wěn)定的和優(yōu)化的形式，整個(gè)試驗(yàn)是在一個(gè)微孔板，溫和的固定及DNA變性維持細(xì)胞的形態(tài)
• 功能測(cè)試：每批功能測(cè)試增殖細(xì)胞相比，高手很多

樣品材料：貼壁和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)在96孔微孔板

細(xì)胞的增殖需要的基因組DNA的復(fù)制。因此，監(jiān)測(cè)DNA合成是一種間接的參數(shù)的細(xì)胞增殖，以及適合的DNA合成的調(diào)節(jié)的研究。[ 3 H ] -胸苷歷來被用于標(biāo)記DNA的復(fù)制（單車）細(xì)胞。為了規(guī)避的[ 3 H ] -胸苷，5 -溴-2'-脫氧尿苷（BrdU）的基礎(chǔ)上的非放射性的替代品已開發(fā)的使用相關(guān)聯(lián)的缺點(diǎn)。化學(xué)發(fā)光技術(shù)的使用提供了增強(qiáng)的靈敏度和寬的測(cè)量范圍。

1. BrdU標(biāo)記試劑
2. FixDenat，準(zhǔn)備使用的
3. 抗BrdU-POD
4. 抗體稀釋液，準(zhǔn)備使用的
5. PBS洗滌緩沖液，10倍濃。
6. TMB底物溶液，準(zhǔn)備使用的

該測(cè)定法的基礎(chǔ)上的BrdU摻入增殖細(xì)胞的基因組DNA的檢測(cè)。通過加入2 - 24小時(shí)的BrdU標(biāo)記細(xì)胞生長(zhǎng)在96孔組織培養(yǎng)微孔板。這個(gè)標(biāo)簽期間，尿嘧啶代替胸腺嘧啶注冊(cè)成立的循環(huán)細(xì)胞的DNA。除去標(biāo)簽介質(zhì)后，將細(xì)胞固定，并在一個(gè)步驟中的DNA變性，加入FixDenat。除去FixDenat后，加入抗BrdU-POD抗體，然后綁定到新合成的細(xì)胞DNA摻入的BrdU。檢測(cè)到的免疫復(fù)合物，通過隨后的底物反應(yīng)。將反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行定量通過使用掃描的多井分光光度計(jì)（ELISA讀數(shù)器）測(cè)量吸光度。