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附图描述
的试剂盒包含nonradioactve 3'-末端标记的寡核苷酸的试剂，所以它们可以用于在一个“凝胶迁移”测定法。它还包含控制，电泳试剂，和一种酶标记的抗体，以促进DNA-蛋白质复合物的检测。注：重组末端转移酶和DIG-11-ddUTP的组合使得非常灵活的标记反应。它可用于标记的任何寡核苷酸的3'-末端（它是否有5'-突出端，3'突出端或平末端）。无论是单链和双链DNA可以贴上标签。

样品
量：3.85皮摩尔或100 ng  
类型：5'-突出末端，3'-突出末端或平末端的寡核苷酸与 
单链或双链的DNA段（30 -约200 bp）注：在理想情况下，被标记的片段应介于30和100个基点。（请参阅下面的更多细节“注意事项”）。

所需时间
退火和标签的寡核苷酸：10分钟
形成的寡核苷酸-蛋白质复合物：25分钟
电泳：1小时至过夜，根据电泳系统
印迹：1 - 2小时
免疫学检测：2小时
曝光透视膜或成象：15 - 40分钟 

DNA-蛋白质相互作用的研究得到了极大的便利，在近几年的快速和简单的“凝胶阻滞”或“凝胶迁移”法。由于游离DNA和DNA-蛋白质复合物的凝胶电泳期间不同迁移，它们可以被分离，并上检测到本机（非变性）的聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶电泳。

1. 贴标缓冲液（5倍浓度），80微升
2. 氯化钴₂解决方案（25毫米），80微升
3. 的DIG-ddUTP解决方案（1 mM的地高辛-11-ddUTP），20微升
4. 重组末端转移酶（400 U /μl），20μL
5. 结合缓冲液（5倍浓度），800μL
6. 控制双链39mer，未标记的寡核苷酸（0.1微克/微升，3.85皮摩尔/微升），40微升
7. 地高辛标记的对照寡核苷酸（DS 39mer，0.4纳克/微升，15.54 fmol /μL），140μL
8. 25 - 75 ng /μl的，控制因素Oct2A（），40μL 
9. 聚并[d（IC）]（0.1微克/微升），200微升
10. 聚并[d（AT）]（0.1微克/微升），加入200μl
11. 聚L-赖氨酸（0.1微克/微升双蒸水），200微升
12. 无溴酚蓝上样缓冲液，1毫升
13. 与溴酚蓝上样缓冲液，1毫升
14. 抗地高辛-AP（750 U / ml）的40微升
15. CSPD（10毫克/毫升），440微升
16. 阻断剂，50克

该的DIG凝胶迁移工具包使用探针，末端标记地高辛-11-ddUTP来检测特定序列的DNA结合蛋白。

标记的DNA段，该片段包含感兴趣的序列的培养的细胞提取物或纯化的因子。非特异性的DNA [聚d（AT），聚d（lC的），该试剂盒中提供的]加入萃取液中，以防止形成大的非特异性蛋白-DLG-标记的DNA复合物（这将保持在凝胶的顶部，并导致涂抹在凝胶电泳）。

将混合物转移到一个本地的聚丙烯酰胺凝胶电泳分离。分离之后，被转移到带正电荷的尼龙膜的寡核苷酸 - 蛋白质复合物，通过电泳，毛细管转移，或印迹。

地高辛标记的配合物，在膜上的免疫测定法中检测到。碱性磷酸酶共轭的抗体[抗洋地黄毒苷-AP（Fab片段）]结合的地高辛标记的oligonucleotides.The固定化碱性磷酸酶去磷酸化的化学发光底物CSPD。CSPD在去磷酸化过程中，发射光，它可以被记录的X-射线胶片上。化学发光信号通?？梢员患觳獾胶?，膜被暴露于15 - 40分钟的膜。（参见“典型的实验”一节）。程序的主要阶段：
 

1. DIG重组末端转移酶的3'-末端标记的双链寡核苷酸与
2. 凝胶移位反应DIG 3'-末端标记的寡核苷酸，其中培养的细胞提取物或纯化的因子
3. 聚丙烯酰胺凝胶电泳，使用快速电泳系统（Pharmacia）的
4. 寡核苷酸转移到尼龙膜（杂交）
5. 交联 
6. 化学发光法检测 

图1： 地高辛标记的寡核苷酸检测。