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轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒是專為快速，敏感和特異的終點RT-PCR分析RNA（總RNA，mRNA，在體外轉錄的RNA，或病毒RNA）基因的特異性引物。特色該套件結合了創(chuàng)新的反應緩沖液，敏感的，高收益的反轉錄的熱啟動系統(tǒng)的高度，高收益的各種模板，包括富含GC-RNA擴增性能的提高。該套件提供了一個方便的，高度敏感的兩步法RT-PCR方法產(chǎn)生的轉錄6.5 kb的應用，如：

• 定性，半定量或定量分析，RNA轉錄水平
• 確定RNA模板的存在或不存在
• 量化分析，通過RNA基因表達（例如，病毒水平定量）
• 6.5 kb的克隆RNA

一步驟的格式是方便，降低反應對反應的變異性，并通過小化的手的步驟防止污染。

• 在很寬的放大范圍內(nèi)獲得高的靈敏度和產(chǎn)量：
  檢測低至1 fg的總RNA （圖1和圖2）。
• 實現(xiàn)高特異性和減少引物二聚體：
  優(yōu)異的性能，計數(shù)套件的專有的熱啟動緩沖（申請中，圖2）。
• 產(chǎn)生長片段：
  生成多6.5 kb的（圖3）的轉錄。
• 抄寫各種模板，即使是困難的（例如，富含GC-RNA）：
  克服高二級結構與熱穩(wěn)定性轉錄因子逆轉錄酶 在一個優(yōu)化的緩沖器（圖1）的結合。
• 節(jié)省時間和提高的結果：一個方便的工具包
  。
• 保護您的RNA樣品：
  保護您的RNA核糖核酸酶降解所提供的耐高溫保護功能的核糖核酸酶抑制劑，是在一步法RT-PCR時，其他的RNA酶抑制劑失敗。
• 在搜索結果中增加信心：
  使用所提供的控制反應監(jiān)測性能。

轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒提供了一個兩步法RT-PCR（引物和模板除外）中的一種方便的格式所需的所有組件。的50-反應包大小還包括10控制反應控制RNA和控制的引物組合。
該套件的RT-PCR酶混合包含4不同的酶轉錄因子的反轉錄酶確保敏感和強大的反轉錄產(chǎn)量高，保護RNA酶抑制劑，充分活躍在升高的溫度下，提供了大的模板保護反轉錄過程中;和展開系統(tǒng)-組成的共混物中的Taq DNA聚合酶和校對聚合酶-突變的可能性減至小，在PCR中提供高產(chǎn)率和高的保真度。
優(yōu)化的RT-PCR檢測反應緩沖液，包括高品質(zhì)的dNTPs和熱啟動系統(tǒng)提供了全面的改進性能。該緩沖區(qū)的*的熱啟動組件結合和隔絕引物在較低的溫度下，以防止從結合非特異性的引物。另一個組件結合的鎂，在溫度依賴性，以防止不受控制的DNA合成。這種新的緩沖制劑是有效的反轉錄過程中以及作為PCR，從而導致增加的特異性和靈敏度。
優(yōu)化的反應緩沖液和酶混合物的組合確保困難的模板與高的二級結構和GC含量不增加反應溫度的情況下的有效轉錄。

一步法RT-PCR是一種非常靈敏的技術，用于確定存在或不存在的RNA模板，或量化的表達水平，通過定性，半定量或定量分析的RNA轉錄水平（例如，病毒級量化）。此RT-PCR方法也有利于罕見消息用于克隆的擴增。一步驟的格式是方便，示出降低反應的反應的變異性，并通過小化的手的步驟防止污染。
單步RT-PCR試 ??劑盒的轉錄因子的轉錄因子逆轉錄酶提供了突出的優(yōu)點，以及優(yōu)點熱啟動一步法RT-PCR格式。

圖2：實現(xiàn)高靈敏度和特異性的轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒。
人的28S核糖體（A） A 389 bp的DNA段的 擴增與轉錄因子的一步法RT- PCR試 ??劑盒一步法RT-PCR試 ??劑盒從其他供應商，制造商建議的反應條件。結果表明，該轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒有效地放大了廣泛的樣品量具有更高的靈敏度和特異性，相比其他供應商的工具包。

（A）


（B）



圖3：  產(chǎn)生片段6.5 KB。
各種金額的全部或病毒RNA反轉錄的轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒使用在包插入反應條件。樣品：10 ⁶份A型肝炎病毒（HAV）264 bp的DNA段RNA（）; 10 ng的總RNA不同組織類型或K-562細胞（139基點，387個基點，597基點和1.8 kb的片段），100 ng的總RNA不同組織類型或HeLa細胞（約2.5 kb，3.6 kb的，5.3 KB 6.0 KB，和6.3 kb片段）。結果表明，有效地轉錄，轉錄因子的一步法RT-PCR試 ??劑盒廣泛的片段大小。